酪氨酸家族激酶在大鼠脊髓背角LTP中的作用及其机制.pdfVIP

生垦痘理生理盘查 JournalofPathophysiology 2011，27(4)：727’一731 · 727 · [文章编号] 1000—4718(2011)04—0727—05 酪氨酸家族激酶在大鼠脊髓背角 LTP中的作用及其机制 钟 袢 ， 黄阳亮 ， 许继德 (。广州医学院生理教研室，广东 广州510182；中山大学附属第一医院脊柱外科，广东 广州510700) [摘 要] 目的：探讨酪氨酸家族激酶(SFKs)在大鼠脊髓背角 C纤维诱发电位的长时程增强 (LTP)中的作 用及其机制。方法：用在体电生理方法检测 SFKs抑制剂对高频刺激坐骨神经诱导的脊髓背角 LTP的影响；用 Westernblotting方法检测高频刺激诱导脊髓LTP的不同时点大鼠脊髓背角磷酸化 SFKs的表达情况 ；用免疫荧光双 染方法检测高频刺激诱导脊髓 L．TP后大鼠脊髓背角磷酸化 SFKs表达的细胞学定位。结果：SFKs的抑制剂(PP2 或SU6656)可以完全阻断LTP的诱导 ，甚至将LTP逆转为长时程抑制 (LTD)；高频电刺激大鼠坐骨神经诱导脊髓 LTP后 15min开始，刺激同侧的脊髓背角中磷酸化SFKs表达明显增加 ，并且这些高表达的磷酸化 SFKs仅仅存在 于脊髓小胶质细胞中。结论：在脊髓背角 ，小胶质细胞中的SFKs是诱导LTP的必要条件，抑制SFKs及其下游分子 可能有助于治疗病理性疼痛。 [关键词] Src家族激酶类；长时程增强 ；疼痛；脊髓背角 [中图分类号】 R338 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．04．020 TheroleofSrc-·familykinasesinlong——term potentiation inratspinal dorsalhorn ZHONGYi，HUANGYang—liang ，XUJi—de (DepartmentofPhysiology，GuangzhouMedicalCollege，Guangzhou510182，China；DepartmentofSpineSurgery，The FirstAffiliatedHospital，SunYet—senUnive~ity，Guangzhou510700，China．E—mail：victoria0720@126．com) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheroleofSrc—familykinases(SFKs)inlong—termpotentiation(LTP)of C—fiber—evokedpotentialsinratspinaldorsal hornandtheunderlyingmechanism．M ETHODS：TheeffectofSFKsin· hibitorsonspinal LTPinducedbyhigh——rfequencystimulationofsciaticnervewasdeterminedbyeleetrophysiologicalmeth- od．ThelevelsofphosphorylatedSFKs(P—SFKs)inspinaldorsalhornweremeasuredbyWesternblottingatdifferent timepointsafterLTPinduction．Th ecelltypesthatexpressedP—SFKsfollowingLTPinductionweredeterminedbydouble — labeledimmunofluorescencestaining．RESULTS：Electmphysiolo caldatarevealedthatpretreatmentwithSFKsinhibi— tors (PP2orSU6656)enabledhigh—rfequencystimulationtoinducelong—termdepression(LTD)ratherthanLTPin spi