黏着斑激酶通过细胞周期蛋白依赖性激酶2、c-junN端激酶促进人肺动脉平滑肌细胞增殖.pdfVIP

维普资讯 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2008，24(2)：303—306 · 303 · [文章编号] 1000—4718(2008)02—0303—04 黏着斑激酶通过细胞周期蛋 白依赖性激酶2、 C-junN端激酶促进人肺动脉平滑肌细胞增殖 林春龙 (湖南师范大学附属岳阳医院，岳阳市立二医院呼吸内科 ，湖南 岳阳414000) [摘 要] 目的：探讨黏着斑激酶 (FAK)促进人肺动脉平滑肌细胞 (HPASMCs)增殖的机制。方法：取肺癌 部分切除手术病人远离肺癌的周围正常组织 ，酶消化法培养细胞。在正义寡核苷酸 (FAKSODNs)、反义寡核苷酸 (FAKASODNs)、随机寡核苷酸(FAKMS)转染后，用免疫印迹方法测定了FAK、C—junN端激酶 (JNK)、细胞周期 蛋白依赖性激酶2(CDK2)的表达；用流式细胞仪测定了细胞周期、细胞凋亡；用免疫组织化学法测定胞浆FAK的 表达。结果：免疫印迹结果表明，与FAKMS组 比较，应用FAKASODNs转染后 HPASMCsFAK、JNK、CDK2蛋白质 的表达明显降低 (P0．01、P0．05、P0．01)；而用正义寡核苷酸转染后则明显增加 (P0．01、P0．05、 P0．05)。流式细胞仪测定结果示：与FAKMS转染组比较：FAKSODNs转染后 ，HPASMCs中G．相的比例显著 减少，S相显著增加 (P0．01)，细胞凋亡减少 (P0．01)；而FAKASODNs转染后结果则相反。免疫组织化学结 果显示：FAKSODNs转染后HPASMCs胞浆染色增强，FAKASODNs转染后胞浆浅染 ，提示FAK表达减少。结论： FAK可能经由JNK、CDK2信号通路促使细胞增殖。 [关键词] 黏着斑激酶 ；人肺动脉平滑肌细胞；C—junN端激酶；细胞周期蛋白依赖激酶类 [中图分类号] R363 [文献标识码] A CDK andJNK mediateFAK toenhanceproliferationinhumanpuimona- ryarterysmoothcells LIN Chun—long (RespiratoryDepartment，theSecondHospitalofYueyangCity，the MedwalCollegeofHunanNormalUniversity，Yueyang 414000，China) [ABSTRACT] AIM：Tofindoutthemechanismoffocaladhesionkinase(FAK)facilitatinghumanpulmonaryar— terysmoothmusclecells(HPASMCs)proliferation．METHODS：HPASMCswereisolatedfromnormalpartoflungsoftwo carcinomapatientswhoundergonelungpartialresection．CulturedHPASMCsstimulatedbyfibronection(40mg／L)were passivelytrnasfectedwithODNs，sensefocaladhesionkinase(FAK)，mismatchsensenadantisense—FAK，respectively． ExpressionofFAK，JunNH2一terminalkinase(JNK)andcyclin—dependentkinase2(CDK2)proteinsweredetectedby immunoprecipitationandWesternblotting．Cellcycleandcellapo ptosiswerena alyzedbyflowcytometry．Inaddi