缺血再灌注诱导大鼠骨骼肌组织蛋白质组变化的初步研究.pdfVIP

· 2l86· 生理基志 ChineseJournalofPathophysiology 2008，24(11)：2186—2190 [文章编号] 1000—4718(2008)11—2186—05 缺血再灌注诱导大鼠骨骼肌组织 蛋 白质组变化的初步研究 张振英， 刘秀华 ， 孙 胜， 郭晓笋 (中国人民解放军总医院病理生理研究室，北京 100853) [摘 要】 目的：研究缺血再灌注 (isehemia／reperfusion，I／R)对大鼠骨骼肌组织蛋白质表达谱的影响。方 法：健康雄性Wistar大鼠l2只随机分为2组 (n=6)：假手术组和 I／R组 ，无创动脉夹夹闭右侧股动脉4h，松夹再 灌注24h建立I／R模型；实验结束时提取骨骼肌组织蛋白质，双向电泳技术分离骨骼肌组织蛋白质，分析差异显示 的蛋白质并选取7个差异显著的蛋白点进行质谱分析。结果：双向电泳可分离(3544-13)个蛋白质，点匹配率为 (78．7±1．4)％，I／R诱导骨骼肌组织10种蛋白质出现明显差异表达，其中6种表达上调，3种表达下调，1种在I／R 组为2个点。质谱鉴定出5个蛋白质为：线粒体醛脱氢酶(mitochondrialMdehydedehydrogenase，ALDH)前体、热休 克蛋白27(heatshock27kDprotein，HSP27)和一未命名蛋白(I／R组表达升高)、d一肌动蛋白(仅～actin，I／R组表 达下降)、核转移因子2(nucleartransportfactor2，NTF一2)在I／R组发生突变。结论：I／R损伤引起大鼠骨骼肌蛋 白质表达发生改变，其中0【一肌动蛋白、ALDH和HSP27表达及 NTF一2突变可能与I／R损伤有关。 [关键词】 再灌注损伤；蛋白质组；电泳，双向，凝胶 ；肌，骨骼 [中图分类号] R363 [文献标识码】 A lschemiareperfusion——inducedproteomicchangesinratskeletalmuscle ZHANG Zhen—ying，LIU Xiu—hua，SUN Sheng，GUO Xiao—sun (DepartmentofPathophysiology，PLAGeneralHospital，Bejiing100853，China．E—mail：xiuhualiu98@yahoo．com．cn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigateischemiareperfusion(I／R)一inducedproteomicchangesinratskeletalmus— cle．METHODS：HealthymaleWistarratswererandomlydividedintotwogroupsasfollows(n=6)：shamgroupand I／R group．IYR ofrighthindlimbwasinducedby4hischemiafollowedby24hreperfusion．The2一DEwasappliedto separatetheproteinsextractedfrom skeletal muscletissueattheend ofexperiment，followedbyCoomassieBrillantblue R一250staining．Computerimageanalysiswasused todeterminethedifferentialexpressionofproteinsbetweenthetwo groups，and7proteinspotsexpresseddifferentiallywerepickedoutandsubjectedtoin—geldigestnadMALDI—TOPfori— dentification．RESULTS：354-413proteinsweredetectedandthematchratewas (78．7±1．4)％．10proteinsdisplayed significantchnagesaf