缺氧预处理减轻内质网应激所致的大鼠心肌微血管内皮细胞损伤.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPath0physiologL 2013，2 (9)：153Z 45 · 1537 · [文章编号] 1000—4718(2013)09—1537-09 · 论 著 · 缺氧预处理减轻 内质网应激所致的大鼠心肌 微血管内皮细胞损伤 武旭东 ， 张振英 ， 王晓初 ， 李玉珍 ， 刘秀华。 (中国人民解放军总医院 门诊部，病理生理研究室，北京 100853) [摘 要] 目的：研究缺氧预处理 (hypoxicpreconditioning，HPC)对内质网应激 (endoplasmicreticulumstress， ERS)所致的心肌微血管内皮细胞(microvascutarendothelialcells，MVECs)损伤的影响。方法 ：以毒胡萝 卜素(thap- sigargin，TG)诱导大鼠心肌MVECsERS，以乳酸脱氢酶(1actatedehydrogenase，LDH)漏出和细胞凋亡率检测细胞损 伤，phalloidin．FITC荧光染色和内质网染色分别观察细胞骨架和细胞内质网形态变化 ，双向电泳 一质谱技术检测 TG作用后内皮细胞蛋 白质谱表达变化，Westernblotting技术检测 ERS相关的分子表达。结果：TG剂量依赖性诱 导MVECsLDH漏出和细胞凋亡，并出现内质网应激分子钙网蛋白(calreticulin，CRT)和葡萄糖调节蛋 白78(glu- cose．regulatedprotein78，GRP78)表达上调 ；HPC减轻TG诱导的MVECs损伤，并可以抑制 TG诱导的ERS相关分 子的表达上调。结论：HPC减轻内质网应激所致的大鼠心肌MVECs损伤。 [关键词] 缺氧预处理；微血管内皮细胞；内质网应激 [中图分类号] R363．1 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000-4718．2013．09．001 Hypoxicpreconditioningprotectsratmyocardialmicrovascularendotheli- alcellsagainstendoplasmicreticulum stress-inducedinjury WU Xu-dong ，ZHANG Zhen—ying ，WANG Xiao—reng ，LIYu-zhen ，LIU Xiu·hua (Out-patientDepartment，DepartmentofPathophysiology，ChinesePeople’SLiberationArmyGeneralHospital，Bejiing 100853，China．E—mail：wuxudong60@yahoo．com．cn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectofhypoxicpreconditioning(HPC)onendoplasmicreticulumstress (ERS)．inducedinjuryinculturedmicmvascularendothelialcells(MVECs)fromrathearts．METHODS：MVECsinjury wasinducedbyanERSinductorthapsigargin(TG)．Lactatedehydrogenase(LDH)leakageandapoptoticrateweredetec— tedtoevaluatetheinjuryofMVECs．Cytoskeletonandendoplasmicreticulum (ER)inMVECswereobservedbyphalloi— din—FITC fluorescence stainingnadER staining，respectively．Two-dimensionalelectrophoresisna dmas