热休克蛋白参与PI3K／Akt介导H2O2预处理的抗凋亡作用.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2011，27(8)：1557—1562 · 1557- [文章编号] 1000—4718(2011)08—1557—06 热休克蛋白参与PI3K／Akt 介导 H2o2预处理的抗凋亡作用木 张 梅 ， 李 卫 ， 郭瑞鲜。， 罗健东 ， 冯鉴强 (广州医学院药理教研室 ，广东 广州510082；暨南大学附属第一医院神经外科 ，广东 广州 510632； 中山大学中山医学院生理教研室 ，广东 广州510080) [摘 要] 目的：探讨热休克蛋白(HSP)是否参与PI3K／Akt信号通路介导的H：0 预处理的抗细胞凋亡作 用。方法：利用PC12细胞建立H：0 预处理对抗高浓度 H：0：诱导细胞凋亡的实验模型，分组如下：(1)空白对照 组；(2)损伤组；(3)预处理 +损伤组；(4)LY294002+预处理+损伤组；(5)LY294002组；(6)quercetin+预处理 +损伤组；(7)17一AAG+预处理+损伤组；(8)溶剂对照组。应用Hoechst33258染色观察细胞凋亡形态 ，碘化丙 啶(PI)染色流式细胞术检测细胞凋亡率，比色法测定caspase一3的活性，免疫印迹法(Westernblotting)测定HSP的 表达水平。结果 ：100txmoL／LH0：预处理 PC12细胞90min可显著地抑制300I~mol／LH202引起的细胞凋亡，使 caspase一3的活性降低，同时上调 HSP70和HSP90的表达。HSP70和HSP90的抑制剂quercetin和 17一AAG拮抗 HO 预处理的抗细胞凋亡作用。PI3K抑制剂 LY294002不仅拮抗 了H0 预处理抗细胞凋亡的作用 ，并且抑制 H0：预处理对HSP70和HSP90的表达上调。结论：PI3K／Akt通路、HSPT0和HsPg0均参与H2o2预处理诱导的 细胞保护作用。并且HSP70和HSP90参与PI3K／Akt信号通路介导H0：预处理的抗细胞凋亡作用。 [关键词】 热休克蛋白质类；过氧化氢；预处理；PI3K／Akt通路；细胞凋亡 [中图分类号] R338．2 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．08．019 Heat—shock proteinsparticipateinH2O2preconditioning—inducedand PI3K／Aktsignalpathway——mediatedanti—-apoptosis ZHANGMei，LIWei，GUO Rui—xian ，LUOJian—dong，FENGJian—qiang (DepartmentofPharmacology，GuangzhouMedicalCollege，Cuahgzhou510082，China；DepartmentofNeurosurgery， TheFirstAffiliatedHospital，．~nanUniversity，Guangzhou510632，hCina；DepartmentofPhysiology，ZhongshanSchool ofMedciine，SunYat—senUniversity，Guangzhou510080，China．E—mail：fengq—sums@163．corn) [ABSTRACT] AIM：Toexploretheeffectsofheat—shockproteins(HSP)onH2O2preconditioning—induced andPI3K／Aktpathway—mediatedanti—apoptosis．M ETHODS：TheexperimentalmodelofH2O2preconditioningagainst apoptosis(inducedbyH2O2atahighconcentration)wassetupinculturedPC12