人TFPI基因转染对兔移植静脉血栓形成和近期通畅率的影响.pdfVIP

生国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2008，24(6)：1051—1055 · 1051 · [文章编号】 1000—4718(2008)06—1051—05 人 TFPI基因转染对兔移植静脉血栓形成和 近期通畅率的影响术 张凯伦 ， 厉 泉， 蒋雄刚， 吴 龙 ， 周 诚 ， 陈 澍 (华中科技大学同济医学院附属协和医院心外科，湖北 武汉430022) [摘 要] 目的：为减少冠状动脉旁路移植术后血栓形成，探讨人组织因子途径抑制因子 (TFPI)基因转染对 兔移植静脉血栓生成的影响。方法：构建真核表达质粒pCMV一(Kozak)TFPI。采用阳离子脂质体和腔内加压灌注 法，转染移植静脉内皮细胞。RT—PCR、Westernblotting和免疫组化法检测外源基因在兔移植静脉中的表达。病理 标本、扫描电镜观察移植静脉血栓形成情况，血管多普勒观测其通畅率。结果：移植静脉中有人TFPI基因和蛋白 表达。静脉移植术后3d，基因转染组、空载体和空白对照组分别有 1条、8条和7条移植静脉发生血栓 ，术后30d， 以上各组分别有0条 、5条和5条移植静脉完全闭塞 ，前者静脉血栓发生率和闭塞率均低于后两者 (P0．05)。扫 描电镜显示两对照组内皮表面有红细胞和血小板黏附、聚集，而转染组基本正常。结论：人TFPI基因干预，减少了 兔移植静脉血栓形成 ，提高了近期通畅率。 [关键词] 冠状动脉旁路移植术；组织因子途径抑制物；基因，TFPI；静脉移植 ；静脉血栓形成 [中图分类号] R654．2 [文献标识码] A Effectofhumantissuefactorpathway inhibitorgenetransfection in vein graftson thrombusformation and earlypatencyrate ZHANGKai—lun，LIQuan，JIANGXiong—gang，WULong，ZHOUCheng，CHENShu (DepartmentofCardiovascularSurgery，UnionHospital， ， MedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceandTech— nology，Wuhan430022，China．E—mail：prozkl@yahoo．con．cn) [ABSTRACT] AIM ：Toreducethrombusformationaftercoronaryarterybypassgraft，weinvestigatedthean— tithmmboticeffectofhumantissuefactorpathwayinhibitor(TFPI)genedeliveryonveinrgafts．METHODS：Theeukary— oticexpressedplasmidvectorpCMV一(Kozak)TFPIWas constructed．Throughpressurizinginfusion，veinendotheliocytes weretrnasfectedwithcationicliposomecontainingtheplasmidvectorpCMV一(Kozak)TFPI．Afteroperation，veinrgafts wereharvestedatthirddayforimmunohistochemical，RT—PCR andWestern blottinganalysisofexogenousgeneexpression andforobservationofthrombusfomr ationbypathologicalmethodnadscnaningelectronmicroscopy．At30thdays，thepa—