人α_1-抗胰蛋白酶在胰岛β细胞移植中免疫抑制和保护作用的研究.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2013，29(4)：619-625 · 619 · [文章编号] 1000·4718(2013)04-0619—07 人 -抗胰蛋 白酶在胰 岛 13细胞移植 中 免疫抑制和保护作用的研究 张晓丹， 叶 剑，廖玉婷， 齐 晖， 邓春燕， 李富荣 (暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院干细胞与细胞治疗重点实验室，广东 深圳 518020) [摘 要] 目的：探讨人 0【-抗胰蛋白酶(hAAT)蛋白在胰岛B细胞移植中的免疫抑制和保护作用。方法： 构建稳定表达 hAAT蛋 白的NIT-hAAT细胞系。将 NIT-1细胞系和 NIT-hAAT细胞系分别2次腹腔注射正常 BALB／c小鼠，诱导细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)产生，将丝裂霉素处理后的2种细胞系与CTL混合培养，流式细胞 术检测NITh·AAT细胞凋亡情况；ELISA检测细胞因子表达；实时荧光定量PCR检测炎症因子mRNA表达。将2种 细胞系分别植入糖尿病模型小鼠左肾包膜内，动态观察血糖和体重变化、血清中胰岛素和c肽水平以及移植部位 的病理学变化。结果：CTL实验中，NIT-hAAT细胞受体 鼠淋巴细胞的细胞毒作用较 NTI．1细胞受体 鼠明显减轻。 hAAT具有减轻细胞凋亡、抑制炎症因子 IL．1p、IL-6mRNA的表达以及调节Thl／Th2细胞因子平衡的作用。NIT． hAAT细胞移植到糖尿病模型小鼠后，血糖明显下降并维持至28d，血清中胰岛素和C肽含量明显升高，移植部位 炎症细胞浸润明显减轻。结论-hAAT蛋白可减轻CTL对B细胞的杀伤作用，抑制炎症因子的表达，短期内可以抑 制移植物免疫排斥反应 ，对胰岛p细胞移植治疗糖尿病具有明显的免疫抑制和保护作用。 [关键词] 0【-抗胰蛋白酶；B细胞；移植；免疫抑制；糖尿病 [中图分类号] R392．11 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000．4718．2013．40．008 Immunosuppressive and protective effects ofhuman -antitrypsin on pancreatic celltransplantation ZHANGXiao—dan，YEJian，LIAOYu-ting，QIHui，DENGChun—yan，LIFu-rong (KeyLaboratoryofStemCellandCellularTherapy，theSecondClinicalMedicalCollege，ShenzhenPeople’sHospiml，Ji- rt~rtUnivenity，Shenzhen518020，China．E—mail：fr／6／2@yahoo．com) [ABSTRACT] AIM：Tostudytheimmunosuppressiveandprotectiveeffectsofhumanotl—antitrypsin(hAAT)on pancreaticB—celltransplantation．METHODS：AnNTI一1cellline(NIT-hAAT)wasconstructed，whichcanstablyex— presshteproteinofhAAT．TheBALB／cmicewereintraperitoneallyinjectedwithNIT-1andNIT-hAATcelllinestwiceto inducecytotoxieT-lymphocytes(CTL)．Theapoptoticsituation，thecytokineexpression，andthemRNAexpressionofin- flammatoryfactorswereexaminedaftermixedcultureofCTLwiht NIT一1orNIT_hAAT celllinepretreatedwithmitomycin． Boht cellline