人AGM区及胎肝基质细胞促进小鼠胚胎干细胞向造血干细胞分化和体内造血重建.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2011，27 )．1193二 · l193 · [文章编号] 1000-4718(2011)06—1193一o6 人 AGM 区及胎肝基质细胞促进小 鼠胚胎干细胞 向造血干细胞分化和体 内造血重建 蔡 耘 ，一， 张绪超 ，弘， 陈惠芹 ， 吴北燕 ， 黄绍良 (中山大学附属第三医院儿科，广东 广州510630；中山大学附属第二医院干细胞研究中心， 广东 广州510120；广东省人民医院医学研究中心，广东 广州510080) [摘 要] 目的：探讨小鼠胚胎干细胞(ESCs)经人主动脉一性腺一中肾(AGM)区及胎肝(FL)基质细胞程序 诱导后，向造血干细胞(HSCs)分化的效率及其造血功能。方法：将El4ESCs诱导为拟胚体 (EB)，并在人AGM区 及FL基质细胞饲养层上进一步诱导分化，培养6d后收集细胞检测Sca一1c—Kit细胞含量、分析造血细胞集落 形成能力及致瘤性。再将不同诱导阶段的EB来源细胞移植经致死量[coh 射线辐照的BALB／c雌鼠，观察生存 率、植入状况和造血重建。结果：(1)EB来源细胞经人AGM区及 FL基质细胞程序诱导后 Sca一1c—Kit细胞含 量为 (21．96±2．54)％，造血集落总数为 (520±52)／10cells，明显优于诱导前及人AGM区基质细胞初步诱导者 (P 0．05)。(2)NOD—SCID小鼠接种经人AGM区及 FL基质细胞诱导的ESCs未见畸胎瘤。(3)BALB／c雌鼠移植 经人AGM区及 FL基质细胞诱导的EB来源细胞后生存率77．8％，14d外周血细胞计数明显改善，存活受 鼠均检 测到供体来源s 基因，而移植人 AGM区基质细胞诱导的EB细胞者 15d内全部死亡。结论：人AGM区及FL基 质细胞能促进小鼠ESCs定向分化为HSCs，有效重建体内造血功能。 [关键词] 主动脉一性腺 一中肾区；肝；基质细胞；胚胎干细胞；造血复建 [中图分类号] R331．2 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．06．027 SupportiveeffectsofhumanAGM regionandfetalliverstromalcellson differentiation ofmurineembryonic stem cells into hematopoietic stem cellsand invivohematopoieticreconstitution CAIYun ，ZHANG Xu—chao ，CHEN Hui—qin ，WU Bei—yan ，HUANG Shao— liang (。DepartmentofPediatrics，TheThirdAffiliatedHospital，SunYat—senUniversity，Guangzhou510630，China；Centerfor StemCellResearch，TheSecondAffiliatedHospital，SunYat—senUniversity，Guangzhou510120，China；ResearchCenter ofMedicalSciences，GuangdongProvincialPeoplesHospital，Guangzhou510080，China．E—mail：zhxuchao3000@ya— hoo．con．cn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatethedifferentiationofmurineembryonicstemcells(ESCs)intohematopoietic stemcells(HSCs)bythesupportiveeffectsofhumanaorta—gonad—mesonephros(AGM)regionandfetalliver(FL) stromalcells．METHODS：El4ESCswereinducedintoembryoidbody(