缺氧后处理中CYP2J3%2fEETs系统对心肌凋亡的影响.pdfVIP

· ll32· 理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2011，27()； 二 ! [文章编号] 1000-4718(2011)06—1132—06 缺氧后处理中CYP2J3／EETs系统对心肌凋亡的影响 赵艳芝 ， 张冬梅 ， 5-~1刚 ， 曾翔俊 ， 王红霞 ， 芦玲巧 ， 张立克 ， 王岩梅 (‘首都医科大学燕京医学院生理与病理生理教研室，北京 101300；首都医科大学基础医学院病理生理教研室，北京 100069) [摘 要] 目的：观察缺血后处理中心肌细胞内源性细胞色素P450表氧化酶2J3／环氧二十碳三烯酸系统 (CYP2J3／EETs)对心肌细胞凋亡的调节作用机制。方法：取Wistar乳鼠(12—24h)心脏做原代心肌细胞培养。实 验分为7组 ：对照组、缺氧／复氧组、缺氧后处理组、CYP2J3转染组、空质粒组、6一(2一炔丙基氧苯基)己酸(PPOH， 一 种CYP2J3抑制剂)组、二甲基亚砜 (DMSO)溶剂组。除对照组外，其它各组均进行缺氧／复氧处理。用MTr法检 测心肌细胞活力，高压液相色谱法检测心肌细胞培养液中11，12一EET浓度，Westernblotting检测心肌细胞中 caspase一3蛋白的表达 ，caspase一3活性检测试剂盒检测caspase一3蛋白的活性。结果：缺氧后处理组心肌细胞活 力和 11，12一EET浓度明显高于缺氧／复氧组 (P0．O1)，CYP2J3转染组比后处理组明显增高 (P0．O1)，PPOH 组比后处理组明显下降(P0．01)。后处理组caspase一3蛋白的表达及活性低于缺氧／复氧组(P0．01)，CYP2J3 转染组 caspase一3蛋白表达及活性低于后处理 (P0．01)，而PPOH组caspase一3蛋白表达及活性高于缺氧后处 理组 (P0．O1)。结论：在缺氧后处理中CYP2J3／EETs可能通过抑制caspase一3蛋白的表达及活性来影响细胞凋 亡，从而对心肌起保护作用。 [关键词] 缺氧后处理；缺St／复氧损伤；心肌细胞；细胞色素P450表氧化酶2J3；环氧二十碳三烯酸；半胱 氨酸天冬氨酸蛋白酶3 [中图分类号] R331．3 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．06．016 EffectsofCYP2J3／EETsonmyocardialapoptosisundertheconditionof hypoxicpostconditioning ZHAOYan—zhi，ZHANGDong—mel。，YUGang—gang，ZENGXiang—jun，WANG Hong—xia ，LU Ling—qiao ，ZHANG Li—ke ，WANG Yan—mei (DepartmentofPhysiologyandPathophysioolgy， MedicalCollege，CapitalMedicalUniversity，Beijing101300， China；DepartmentofPathophysiology，BasciMedicalCollege，CapitalMedcialUniversity，Beijing100069，China．E— mail：mlhwww@163．corn) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheeffectsandunderlyingmechanismofendogenouscytochromeP4502J3／ep— oxyeicosatrienoicacids(CYP2J3／EETs)systemonmyocardialapoptosisundertheconditionofhypoxicpostconditioning (HPost)．METHODS：PrimarymyocardialcellsfromneonatalWistarrats(12h一24h)wereculturedanddividedinto7 groupsasfollows：controlgroup，hypoxia／re