上调miR-187＊表达对人结肠癌细胞株增殖活性的影响.pdfVIP

· 1946 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2013，29(11)：1946．1951 【文章编号] 1000—4718(2013)11-1946—06 上调 rniR．187冰表达对人结肠癌细胞株 增殖活性的影响米 张丽静， 刘 博， 赵增仁 ， 樊智彬， 田延锋 (河北医科大学第一医院普外科，河北 石家庄 050031) [摘 要] 目的：研究微小RNA．187 (miR．187 )在人结肠癌细胞株及正常结肠组织中的表达 ，同时分析 miRNA．187 上调对人结肠癌细胞增殖和细胞周期的影响。方法：选取3例结直肠癌组织及配对正常黏膜组织进 行miRNA芯片检测，筛选出大肠癌组织中异常表达的miRNA；提取8株结肠癌细胞株和 l0例正常结肠组织中总 RNA，采用Taqman实时定量PCR方法检测miR．187$的表达；预测miR一187 的靶基因，采用实时定量PCR方法检 测靶基因的表达；采用脂质体介导的转染方法将miR一187 模拟物转染人结肠癌细胞株HCT116；检测转染后 miR- 187 和靶基因的表达；通过 MTS试剂盒检测细胞增殖能力，流式细胞术检测 miR一187 对细胞周期的影响。结 果：miRNA芯片检测结直肠癌组织中miR．187$的表达较正常黏膜明显降低；miR一187 在结肠癌细胞株中的表达 较正常结直肠黏膜组织明显下调 ；而B细胞特异性莫洛尼小鼠白血病病毒整合位点 1(BMI一1)mRNA在结肠癌细 胞株中表达较正常黏膜组织中明显增高 ；转染miR一187 模拟物后 ，miR一187 表达明显增加；同时miR一187 的高 表达可以显著抑制BMI一1mRNA的水平；miR．187 模拟物转染组和阴性对照组相 比，细胞增殖活力明显受抑制 (P0．05)，同时增殖细胞核抗原表达亦明显降低；细胞周期检测结果显示 ，miR-187 模拟物转染组G：／M期细胞 增多，和阴性对照组间差异有统计学意义。结论：miR一187 在人结肠癌细胞株中表达下调；上调miR一187 表达 可抑制结肠癌细胞增殖活性 ，影响结肠癌细胞周期 ；miR一187 可能通过抑制BMI一1在结肠癌中发挥抑癌作用。 [关键词] 结肠肿瘤；微小 RNA一187 ；细胞增殖 ；细胞周期 [中图分类号] R735．3 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000-4718．2013．11．005 Up-regulation ofmicroRNA一187木 inhibitsproliferation ofhuman colon cancercelllineHCTll6 ZHANGLi-jing，UUB0，ZHAOZeng—ren，FANZhi—bin，TIANYan—feng (DepartmentofGeneralSurgery，theFirstHospital，HebeiMedicalUniversity，Shijiazhuang050031，China．E—mail：zzr— doctor@163．com) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheexpressionofmicroRNA-187$ (miR一187 )inhumancoloncancercell linesandnormalcolontissues，andtodeterminetheeffectsofmiR-187 up-regulationontheproliferationandcellcycle ofhumancoloncancercelllineHCT116．METHODS：TheexpressionprofilingofmiRNAsin3colorectaladenocarcinoma samplasandtheirmatched normal tissuesampleswasperformedusingmiRNA microarraychip．ro￡alRNA wasisolated from