上调SMYD3对人胆管癌FRH0201细胞中DNMT3B表达及细胞增殖的影响.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiolo~ 2012，28(3)：415—419 · 415 · [文章编号] 1000—4718(2012)03—0415—05 上调 SMYD3对人胆管癌 FRH0201细胞中 DNMT3B表达及细胞增殖的影响木 程 帝 ， 李志花 ， 陈汝福 ， 郭 宁 ，廖巧芳 ， 郑礼平 ， 周泉波 ， 周嘉嘉 (中山大学孙逸仙纪念医院 肿瘤科，。肝胆外科，广东 广州510120) [摘 要] 目的：研究人胆管癌细胞株FRHo201中SET和MYND结构域含有蛋白3(SETandMYNDdomain — containingprotein3，SMYD3)过度表达对 DNA甲基化转移酶3B(DNAmethyltransferase3B，DNMT3B)表达及细胞 增殖能力的影响。方法：瞬时转染 SMYD3真核表达质粒后，RT—PCR检测细胞中DNMT3BmRNA水平的变化； Westernblotting检测细胞中DNMT3B蛋白水平的变化 ；CCK一8检测细胞增殖能力的改变；流式细胞术检测细胞周 期的改变。结果：以未处理组为对照，胆管癌细胞FRH0201在转染pEGFP—C3一SMYD3质粒后，DNMT3B蛋白及 mRNA表达均显著上升(P0．01)；细胞的增殖能力显著提高、细胞增殖速度加快(P0．05)；进入G2／M期 的细胞 明显增多(P0．05)。结论：过度表达 SMYD3，可引起细胞中DNMT3B的表达上调并增强细胞增殖能力。 [关键词] FRH0201细胞 ；甲基化 ；组蛋白甲基化转移酶；DNA甲基化转移酶 [中图分类号】 R735．8 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．03．006 EffectofSMYD3over--expressiononDNMT3B levelsandproliferation abilityinhuman cholangiocarcm‘omacelllineFRH0201 CHENGDi，LIZhi—hua，CHENRu—fu，GUONing，LIAOQiao—fang，ZHENGLi — ping，ZHOUQuan—bo，ZHOUJia—jia‘ (D‘epartmentofOncology，DepartmentofHepatobiliarySurgery，SunYat—senMemorialHospital，SunYat—senUnive~i— ty，Guangzhou510120，China．E—mail：cheng~53@163．corn) [ABSTRACT] AIM：ToexploretheeffectofSETandMYNDdomain—containingprotein3(SMYD3)over—ex- pressionontheexpressionofDNAmethyltrnasferase3B(DNMT3B)andtheproliferationabilityinhumnacholnagiocarci- nomacelllineFRH0201．METHODS：Transienttransfection ofSMYD3 eukaryoticexpressionplasmidpEGFP—C3一 SMYD3intohumna cholangiocarcinomacelilineFRH0201wasperformed．TheexpressionofDNMT3BatmRNA nadpro- teinlevelswasdetectedbyRT—PCRnadWesternblotting．respectively．CellproliferationwasexaminedbyCCK一8meth- odna dcellcyclesituationwascheckedbyflow cytometry．RESULTS：Aftertrnasfeetedwiht SMYD3eukaryoticexpression plasmidpEGFP—C3一SMYD3．theover—expressiono