双氢青蒿素对小鼠T细胞的免疫抑制作用.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2010，26(3)：417—423 · 417 · [文章编号] 1000—4718(2OLO)O3一o417-07 · 论 著 · 双氢青蒿素对小鼠T细胞的免疫抑制作用 叶燕霞 ， 曾耀英 ， 黄秀艳 ， 陆晓宇 ， 曾祥凤 ， 王希朝 (暨南大学组织移植与免疫中心，广东 广州 510632；华南师范大学激光生命科学教育部重点实验室，广东 广州510631) [摘 要] 目的：研究双氢青蒿素(DHA)在体外对ConA诱导的小鼠T细胞增殖的影响，探讨其可能的免疫 作用机制。方法：加入不同浓度DHA，以多克隆刺激刺刀豆蛋白A(ConA)诱导T细胞活化增殖，用羧基荧光素双 醋酸盐琥珀酰亚胺酯 (CFDA—SE)染色法分析T细胞增殖情况；利用流式细胞术 (FCM)结合双色免疫荧光染色技 术检测CD3T细胞早 、中、晚期活化标志CD69、CD25、CD71表达情况；用Fluo一4／AM荧光钙离子探针技术检测细 胞内钙离子([ca“]．)浓度的变化；以碘化丙锭 (PI)染色分析细胞周期分布；运用流式细胞术(FCM)结合三色荧 光染色技术检测CD4CD25highTreg早期活化抗原CD69表达情况。结果 ：CFDA～SE染色结果显示，DHA能有效 抑制 ConA诱导的T细胞增殖，并呈时间一剂量依赖性；DHA对 ConA刺激的CD3T细胞CD69、CD25的表达有 促进作用，而对 CD71的表达有抑制作用，均呈剂量依赖性；DHA单独作用不能引起T细胞[ca“]，的升高，在Con A的刺激下能引起[ca“]i浓度升高；PI染色流式分析结果显示，DHA阻滞细胞于G。／G，期 ，阻止细胞进入 s期和 G／M期；DHA能够下调CD4CD25highTreg细胞CD69的表达。结论：DHA对小鼠淋巴细胞的增殖有明显的抑制 作用，是一种潜在的免疫抑制剂。 [关键词】 双氢青蒿素；免疫抑制；T淋巴细胞；CIM CD25highTreg；流式细胞术 【中图分类号] R392．12 [文献标识码] A ImmunosuppressiveeffectofdihydroartemisininonmurineT lymphocytes YEYan—xia ，ZENG Yao—ying ，HUNAG Xiu—yan ，LU Xiao—yu ，ZENG Xiang— feng ．WANG Xi—Chao (InstituteofTissueTransplantationandImmunology，JinanUniversity，Guangzhou510632，China；MOEKeyLaboratory ofLaser Science＆InstituteofLaserLifeScience，SouthChina NormalUnive~ity，Guangzhou510631，hCina．E— mail：~engyy@jnu．edu．cn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectofdihydroartemisinin(DHA)ontheproliferationofmurineT lymphocytesstimulatedbyConA invitroanditsrelatedimmunosuppressivemechanism．METHODS：MurineTlympho— cyteswerestimulatedbyConA andtreatedwithdifferentconcentrationsofDHA．Cellproliferationwasmeasuredbycar— boxylfluoresceindiacetatesuccinmidylester(CFDA—SE)staining．TheexpressionofCD69，CD25andCD71，whichwas themarkerofearly，midd