顺铂对HeLa细胞6-磷酸葡萄糖脱氢酶表达和活性的影响.pdfVIP

维普资讯 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 24(!)；垫二 · 1323 · [文章编号1 1000—4718(2008)07—1323一o4 顺铂对 HeLa细胞 6一磷酸葡萄糖 脱氢酶表达和活性的影响 蔡鹏程， 张德太， 杨菊红， 王 琳， 胡丽华 (华中科技大学同济医学院附属协和医院，湖北 武汉430022) [摘 要] 目的：探讨化疗药物顺铂在体外对 HeLa细胞6一磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PD)mRNA表达和活性的 影响。方法：5mg／L顺铂作用于HeLa细胞一段时间后，MTr法检测细胞的生长抑制情况。Beutler改良法测定胞 内还原型谷胱甘肽的含量，速率法测定 G6PD活性，采用实时荧光定量 RT—PCR观察G6PDmRNA的表达水平。 结果：顺铂在体外能明显抑制 HeLa细胞的生长。顺铂作用4h和24h后，G6PDmRNA的表达水平增强，且 G6PD 活性高于未加药对照组 (P0．05)。4h实验组GSH含量低于对照组。结论：顺铂能诱导HeLa细胞 G6PDmRNA 表达增加 ，G6PD活性增强。 [关键词] 顺铂；HeLa细胞；葡糖 一6一磷酸脱氢酶；谷胱甘肽 [中图分类号] R363 [文献标识码] A Effectsofcisplatin on glucose一6一phosphatedehydr0genaseexpression and activityin HeLacells CAIPeng—cheng，ZHANG De—tai，YANGJu—hong，WANG Lin，HU Li—hua (UnionHospital， ，l MedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceTechnology，Wuhan430022，China．E—mail： xhhlh@ 126．com) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectofcisplatin(DDP)ontheexpressionofglucose一6一phosphatede— hydrogenase(G6PD)mRNAandG6PDactivityinHeLacellsinvitro．METHODS：Aftertreatedwiththeconcentration of5mg／LDDPforseveral hours．HeLacellswereharvested．Thegrowth inhibitionwasdetectedbymethylthiazolyltet— razolium (MTT)assay．Thecontentofglutathione(GSH)wasdeterminedbyBeutlermethod．TheactivityofG6PDwas detemr inedbyvelocitymethod．TheexpressionofG6PD mRNA wasassayedbyfluorescentquantitativereal—timePCR． RESULTS：DDPsignificantlyinhibitedtheproliferationofHeLacells vitro．Atboth4hand24 h，theexpressionsof G6PDmRNAwereup—regulatedandG6PD activitywerehigherthanthatincontrolrgoup(P0．05)．Thecontentof GSH in4hgroupWas lowerthanthatincontrolrgoup．CONCLUSION ：DDPup—regulatestheexpressionofG6PD mR— NA andincreasesG6PD activity．Thesemaybecontributestoth