去胰岛素的乳腺癌干细胞培养及雌激素诱导的作用.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPath0physiology 2013，29(12)：2297—2300 · 2297 · [文章编号] 1000—4718(2013)12—2297—04 · 实验技术 · ：l： 去胰岛素的乳腺癌干细胞培养及雌激素诱导的作用 陈琼霞 ， 李 艳 ， 邓 昊 ， 刘丽江。 (江汉大学医学院病理学与病理生理学教研室 ，江大病理诊断所，湖北 武汉430056) [摘 要] 目的：探讨去除胰岛素的乳腺癌干细胞悬浮培养方法以及雌激素诱导的作用。方法：通过使用去 除胰岛素的悬浮培养方法获得乳腺癌细胞系MCF7的肿瘤球细胞，并通过形态学观察、CD24一CD44表达细胞的检 测、醛脱氢酶 1(ALDH1)蛋白的表达以及细胞多向分化能力对该干细胞模型的可靠性进行鉴定。给予 10 ”mol／L 1731一雌二醇 (E：B)对该干细胞模型处理7d，观察上述相关指标的变化。结果：去除胰岛素的悬浮培养方法获得 的瘤细胞球呈葡萄状 ，由30～60个细胞组成。细胞球显示细胞角蛋 白18和CD10蛋 白均表达阳性，CD44CD24 细胞的含量及ALDH1蛋白表达量均较贴壁细胞明显增高 (P0．05)。使用 10。。。mol／LEp处理 MCF7肿瘤球细 胞7d，肿瘤球细胞数及体积增大。使用 10 ”mol／LEp处理 MCF7肿瘤球细胞 24h，CD44 CD24一细胞数量及 ALDH1蛋白表达量较未处理组明显升高(P0．05)。结论：去除胰岛素的悬浮培养方法可有效建立乳腺癌干细 胞体外研究模型 ，并可用于E：p对乳腺癌干细胞生长调控的研究。 [关键词] 乳腺肿瘤 ；干细胞；MCF7细胞；1731一雌二醇 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2013．12．031 Breastcancerstem cellsculturedwithoutinsulinandeffectofestrogenin- duction CHENQiong—xia，LIYan，DENGHao，LIULi-jiang (DepartmentofPathologyandPathophysiology，SchoolofMedicine，JianghanUniversity2JiangDaPathologyCenter，Wu— han430056，China．E—mail：liulijiang@ 163．com) A『BSTRACT] AIM ：Todeterminewhethersuspensionculturemediumwithoutinsulincanbeusedtofeedbreast cancertumorsphere，ornot．METHODS：MCF7cellswereusedtobuildtumorsphere．Themorphologicalchanges，CD44 CD24 expression，aldehydedehydrogenase1(ALDH1)expressionandmultipledivisionabilityweremeasuredtoidentify thebreastcancerstemcellsandtodetectthefunctionof1713一estradiol(E2p)intumorsphereofMCF7cells．RESULTS： Thetumorshere，eachcontaining30to60cells，wasobtainedbythemethodofinsulin—removalsuspensionculture．These cellswerecytokeratin18andCD10p