犬骨髓基质干细胞与聚羟基烷酸酯体外相容性的实验研究.pdfVIP

国痘理生理 ChineseJournalofPathophysiology 2008，24(11)：2220—2223 [文章编号] 1000—4718(2008)11—2220—04 犬骨髓基质干细胞与聚羟基烷酸酯 体外相容性的实验研究 王其友， 戎利民， 徐义春， 蔡道章 (中山大学附属第三医院骨科 ，广东 广州510630) [摘 要] 目的：评价聚羟基烷酸酯 (PHBV)作为组织工程支架与犬骨髓基质干细胞 (BMSCs)的生物相容 性。方法：原代培养犬BMSCs，传至3—4代后，接种至PHBV膜和泡沫样三维支架上，以接种至培养板上细胞为对 照组，倒置显微镜下观察细胞形态；于培养 1、2、3周分别采用4％多聚甲醛固定，常规组织切片，HE染色；在5、10、 14d用Hoechst33258荧光法定量测定细胞内DNA含量 ，BCA法测定蛋白质含量。结果：倒置显微镜观察PHBV纤 维较粗，且透光性差，在相差显微镜下不易观察。第3—4代BMSCs接种至PHBV膜上2h后即大部黏附，3d后伸 展良好，呈纺锤形或梭形，在三维支架的孔隙内立体生长，1周开始细胞间连接，3周广泛连接，分泌大量基质；培养 接种 1周后 ，取二个膜状 PHBV固定，HE染色后，见骨髓基质干细胞增殖。培养接种2周后，骨髓基质干细胞增殖 明显，呈梭形密布于膜状PHB~上。培养接种3周后，骨髓基质干细胞增殖较第二周无明显变化。定量测定接种 的细胞内DNA含量和蛋白质含量与对照组相比无显著差异。结论：PHBV作为BMSCs的组织工程支架材料，具有 良好的生物相容性 [关键词] 组织工程；骨髓基质干细胞；聚3一羟基烷酸酯一co3一羟基戊酸酯；生物相容性材料 [中图分类号】 R318 [文献标识码] A ’ Experimentalstudy on biocompatibility between canine bone marrow stem cells and copolymersofpoly --3 ——hydroxybutyrate--CO --3 -— hydroxyvalerate WANGQi—you，RONGLi—min，XUYi—chun，CAIDao—zhang (DepartmentofOrthopaedicSurgery，TheThirdHospitalofSunYat—seaUniversity，Guangzhou510630，China．E—mail： wqiyou@163．COrn) [ABSTRACT] AIM：Toevaluatethebiocompatibilitybetweencopolymersofpoly一3一hydroxybutyrate—co一3一 hydmxyvalerate(PHBV)andbonemarrowstemcells(BMSCs)．METHODS：CanineBMSCswereisolatedandcultured． Thecellsinpassage3—4vereseededontothePHBVfilmsandthree—dimensional foams．Theseededcellswereobserved underinvertedmicroscopeformorphologyandcellattachmentontothePHBV filmsat1，2or3weeksafterseeding．With 4％ paraformaldehydeformalinandstaining．theproteincontentinseededcellsWas determinedbybicinchoninicacidassay (BCA)．ThecontentofDNAwasquantifiedusingtheHoechst33258assay．RESULTS：Observationunderinvertedmi- croscopeshowedthatthePHBV fabricwasfairlythickness，|