缺血后适应对树鼩海马CA1区神经元Akt信号转导调控的机制研究.pdfVIP

· 560 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPh【卫Y (2；鱼= [文章编号] 1000-4718(2011)03一o560—06 缺血后适应对树鼬海马 CA1区神经元Akt信号 转导调控的机制研究术 汤 谤 ，李树清 ， 李 凡 ，李 飞 ， 张 颖 (昆明医学院第一附属医院皮肤／医学美容科，云南 昆明650032；昆明医学院基础医学院病理生理教研室，云南 昆明650031) [摘 要] 目的：了解缺血后适应 (PC)对树晌脑缺血时海马CAI区神经元磷脂酰肌醇一3激 Akt(PI一 3K／Akt)下游底物丝／苏氨酸蛋 白激酶(AktSer一473／Thr一308)磷酸化(Akt[pS473]／Akt[pT308])的调控，探讨 Akt信号转导通路在缺血Pc脑保护中的作用机制。方法：以树购为实验动物 ，用光化学诱导法复制局部脑缺血， 并于脑缺血后3h30min反复夹闭缺血侧颈总动脉3个循环 (5min1个循环)以制备后适应模型。在光镜、电镜下 观察海马CA1区神经元损伤及其超微结构变化的同时，采用免疫组化法了解脑缺血树购海马．CAI区神经元 Akt [#473]／Akt[pT308]的分布及定位，并以灰度值检测磷酸化强度。结果：脑缺血可导致树鼢海马损伤及细胞超微 结构的明显异常；而缺血Pc可使海马CA1区神经元超微结构的异常明显改善。免疫组化结果显示，对照组海马 CA1区Akt[pS473]及 Akt[pT308]的磷酸化为阴性。缺血 Pc组与缺血组在不同时点的胞浆、胞膜均出现 Akt [pS473]，但缺血72hAkt[pS473]减弱(灰度值 146．6-4-2．9)。缺血组Akt[pT380]仅在4h明显增强 (灰度值 135．5±2．2)，随后则未检测到(灰度值分别为165．3±3．7，163．34-2．5)。而缺血Pc组4h时点Akt[pT308]呈阴 性。随后24h、72h则持续显著的阳性。结论 ：缺血 PC能明显减轻海马CA1区神经元的缺血性损伤，其保护机制 可能与 AktSer一473和 ，IIlr一3082个位点磷酸化导致PI一3K／Akt信号转导途径的激活有关。 [关键词] 脑缺血；缺血后适应；磷脂酰肌醇一3激酶／Akt；信号转导；树嗣 [中图分类号] R363 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．03．027 EffectsofischemicpostconditioningonneuronalAktsignalingpathways inhippocampusCA1areaaftercerebralischemiaintreeshrews TANG Yang ，LIShu—qing ，LIFan ，LIFei，ZHANGYing (DepartmentofDermatologyMedicalCosmetology，TheFirstAffiliatedHospital，KunmingMedicalCollege，Kunming 650032，China；DepartmentofPathophysiology，KunmingMedicalCollege，Kunming650031，China．E—mail：shu— qn／g591@hotmail．com) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatethephosphatidylinositol3一kinase／Akt(PI一3K／Akt)Ser一473／Thr一308／ phosphorylation(Akt[pS473]／Akt[pT308])andtheintensityoftheneuronsinhappoeampusCA1areaunderthecondi． tionsofhtromboticcerebralisehemiaandpostconditioningintreeshrews．METHODS：Thethromboticfocal cerebral is-