胎鼠胰腺干细胞原位移植治疗糖尿病的实验研究.pdfVIP

ChineseJournalofPathophysiology 2008，24(8)：1595—1599 · 1595 · [文章编号】 1000—4718(2008)O8—1595一o5 胎鼠胰腺干细胞原位移植治疗糖尿病的实验研究木 张 悦， 张育森， 余小舫 ， 李富荣， 周汉新， 潘小华 (深圳市人民医院普通外科，暨南大学第二临床医学院，广东 深圳 518020) [摘 要】 目的：原位移植胎鼠胰腺干细胞 ，探讨其在糖尿病鼠胰腺微环境中转分化为胰岛样细胞团的可行 性。方法：分离纯化SD大鼠胎鼠胰腺干细胞；荧光原位杂交 (fluorescent situhybridization，FISH)检测SRY上的 性别决定区(sexdeterminingregiononY，SRY)以鉴别雄雌；免疫细胞化学检测巢蛋白(Nestin)、胰十二指肠同源异 型盒基因(PDX一1)的表达及流式细胞术测定 Nestin细胞含量以鉴定胰腺干细胞 ；分胰腺实质内移植组、实验对照 组及空白对照组，1O只／组；监测各组大鼠血糖及血浆胰岛素含量，8周后取大鼠胰腺组织切片观察，FISH检测 SRY，逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR)观察各组大鼠胰腺内Nestin、PDX一1及胰岛素等mRNA的表达情况，免 疫印迹(Westernblotting)检测PDX一1及胰岛素的蛋白表达水平。结果：有5只胎鼠经 FISH检测为雄性。免疫组 化示存在 Nestin和PDX一1阳性细胞，流式细胞术测定Nestin阳性细胞含量 占74．1％。胰腺实质内移植组大鼠于 移植后第3周血糖开始下降，血浆胰岛素水平逐渐升高；第5周血糖及血浆胰岛素均达到正常水平并维持。取第8 周大鼠胰腺组织切片HE染色可见外源性细胞团，FISH检测 SRY阳性。RT—PCR示胰腺实质内移植组胰腺组织 内胰岛素的mRNA表达明显高于实验对照组(P0．05)，而Nestin及 PDX一1的mRNA表达量高于实验对照组及 正常组 (P0．05)。Westernblotting示干细胞移植组胰腺组织内胰岛素含量接近正常大鼠(P0．05)，而PDX一1 的含量高于正常大鼠(P0．05)。结论：胎鼠胰腺干细胞原位移植后可在体内转分化为胰岛样细胞团且具有良好 的功能，移植后可使血糖降至正常，胰腺干细胞原位移植可能为 1型糖尿病的治疗提供了一个新的策略。 [关键词】 胎鼠；胰腺干细胞；原位移植 ；糖尿病 [中图分类号】 R363 [文献标识码】 A Orthotopictransplantfetalratpancreaticstem cellsfortreatingdiabetes mellitus ZHANG Yue，ZHANG Ylu—sen，YU Xiao—fang，LIFu—rong，ZHOU Han—xin，Pan Xiao．．hua (DepartmentofGeneralSurgery，ShenzhenPeoplesHospital，The2ndClinicMedcialColelgeof mnUniversity，Shenzhen 518020，China．E—mail：yttxfshui@hotmail．com) [ABSTRACT] AIM：Toobservethepossibilityofdifferentiationoffetalratpancreaticstemcellsintoislet—like cellclusterbytransplnatationoffetalrat pnacreaticstem ceHsintopnacreaticparenchymaindiabeticSD rats．M ETH- ODS：Thepnacreaticstemcells(PSCs)wereharvestedfrompnacreaticrudimentsofSDratembryos