纤维蛋白胶为载体构建人羊膜上皮细胞植片的实验研究.pdfVIP

理生理杂志 ineseJournalofPathophysiology 2008，24(6)：1199—1204 · 1199- [文章编号] 1000—4718(2008)06—1199—06 纤维蛋白胶为载体构建人羊膜上皮 细胞植片的实验研究 赵 芳 ， 陈 剑 ， 吴 静 ， 徐锦堂 ， 周 清 ， 王彦平 ， 金 玲 ， 赵松滨 (暨南大学 ’附属第一医院眼科，医学院眼科研究室，医学院病理生理学教研室，广东 广州 516032) [摘 要] 目的：探讨利用纤维蛋白胶作为支架构建组织工程人羊膜上皮细胞(HAECs)植片重建眼表的可 行性。方法：取足月剖宫产胎盘羊膜，经胶原酶和胰蛋 白酶消化后，获得 HAECs。在体外构建的纤维蛋 白胶片上培 养 HAECs，细胞融合成片后 ，利用气液界面复层化 ，采用倒置显微镜、组织切片、HE染色、细胞角蛋白免疫组织化学 染色和扫描电子显微镜观察HAECs的生长情况。结果：HAECs在纤维蛋 白胶表面生长 良好，细胞呈圆形或多角 形 ，长满后呈上皮细胞特有的铺路石样外观 ，扫描电镜观察细胞表面有丰富的微绒毛，细胞广谱角蛋 白单克隆抗体 染色阳性。细胞有复层生长趋势，植片较为透明。结论 ：以纤维蛋 白胶为载体构建组织工程人 HAECs植片，具有 眼表重建的潜在运用价值。 [关键词] 羊膜上皮细胞 ，人；纤维蛋白组织黏着剂；细胞培养 [中图分类号] R363 [文献标识码] A Experimentstudyoffibringelsasthesubstrateforcultivatinghumanam- nioticepithelialsheets ／nvitro ZHAOFang，CHENJian，WUJing，xUJing—tang，ZHOUQing，WANGYan— ping ，JINLing，ZHAO Song—bin (DepartmentofOphthatmology，TheFirstAffdiatedHospital， Departmentof Ophthatmology，MedicalCollege， Departmentof胁 幻p zDgy，MedcialCollege，．~nanUniversity，Guangzhou516032，China．E—mail：Drchenj@163． tom) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatethefeasibilityofusinghumananmiotieepihtelialcells(HAECs)shee~， whichareculturedbyusingabiodegradablefibrinsealanttore—estbalishcornealsurfacelayer．METHODS：Humna am- niotiemembrnae(AM)harvestedathtetimeofelectivecaesarena sectionWasdigestedbyeollagenasenadtrypsinrespec- tivelytoobtainHAECs．TheHAECswereplnatedonMillicellculturedishescoatedwiht biodegradbalefibringlne，nad culturedbyusinghteair—liftingcultivation．Th eHAECssheetswereinvestigatedmorphologicallybyHematoxylin —Eosin staining，scnaningelcetronmicroscopy(SEM)nadwereidentifiedbyeytokeratinimmunohistochemistry．RESULTS： HAECsshee~weretrnasparentnadsuccessfullyculturedbyusinga