抑癌基因KLF6在肝癌HepG2细胞修复DNA损伤过程中的作用研究.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2009，25(7)：1279—1282 · 1279 · [文章编号] 1000—4718(2009)07—1279—04 抑癌基因KLF6在肝癌 HepG2细胞修复 DNA 损伤过程 中的作用研究 潘修成， 杨 帆， 陈 明， 郭忠胜， 季 芳，傅涓涓 (徐州医学院附属医院感染性疾病科，江苏 徐州221002) [摘 要] 目的：研究抑癌基因KLF6对肝癌 HepG2细胞修复 DNA损伤能力的影响。方法：RT—PCR及 Westernblotting技术测定HepG2细胞在5mg／L顺铂作用 12、24、36h后KLF6mRNA及其蛋 白水平变化。采用宿 主细胞再活化反应 (HCR)检测KLF6稳定表达 HepG2细胞修复DNA损伤的能力。结果：在 5m#L顺铂作用下， 随作用时间延长，KLF6mRNA及其蛋白水平增高，但作用 36h，KLF6蛋白水平下降。KLF6稳定表达HepG2细胞 修复被顺铂损伤质粒 DNA的能力 明显高于对照组。结论 ：DNA损伤能诱导肝癌 HepG2细胞 KLF6基因表达， KLF6基因在细胞DNA损伤修复过程中发挥一定作用。 [关键词] 基因，肿瘤抑制；基因，KLF6；DNA损伤；DNA修复；HepG2细胞 [中图分类号] R735 [文献标识码】 A EffectofKLF6geneonnucleotideexcisionrepaircapacityinhumanhep- atocellularcarcinomacelllineHepG2 PAN Xiu—cheng，YANG Fan，CHEN Ming，GUO Zhong—sheng，JIFang，FU Juan— juan (InfectiousDepartmentofXuzhouMedicalCollegeAffiliatedHospital，Xuzhou221002，China．E—mail：panxiuch6808@ 163．com) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetherolesofKLF6geneonnucleotideexcisionrepaircapacityofhumanhepa— tocellularcarcinomacelllineHepG2．M ETHODS：ExpressionofKLF6wasdetectedbyRT—PCR andWesternblotting， ~llowedbyHepG2cellstreatedwithcisplatin (5mg／L)．HostcellreactivationassayWas usedtoassessnucleotideexci— sioncapacityofcisplatin—damagedHepG2cells．RESULTS：UpregulationofKLF6mRNA orproteininHepG2cellstrea— tedwith5mg／Lconcentrationofcisplatinwasinatime—dependentmanner．butKLF6proteinwasdegradedwhenexposed tocisplatinatsanledose(5mg／L)for36h．HCRassayshowedthatNERcapacityofKLF6overexpressingHepG2cells wassignificantlyenhanced，comparedtothatincontrolcells．CONCLUSION ：DNA damageinducedbycisplatininduces theexpressionofKLF6gene．KLF6genemayplayanimportantroleinmechanism ofnucleotideexcisionrepairinHepG2 ceils． [KEYWORDS] Genes，tumorsuppression；Genes，KLF6；DNAdamage；DNArepair；HepG2c