调控食管癌EC9706细胞DNA聚合酶β表达的初步研究.pdfVIP

Chinese — — JournalofPathophysiology 2010，26(8)：1464—1467 [文章编号] 1000—4718(2010)08—1464—04 调控食管癌 EC9706细胞 DNA聚合酶 13表达 的初步研究：l： 王 涛 ， 董子明 ， 赵国强 (河南省人民医院医学遗传研究所，河南 郑州450003；郑州大学基础医学院，河南 郑州450052) [摘 要] 目的：观察DNA聚合酶B(DNApol8l)对食管癌EC9706细胞生物学特性的影响。方法：以pSINsi — hU6为载体构建 DNApoll8靶向的siRNA表达质粒，转染EC9706细胞，G418筛选。流式细胞术和裸鼠体内成瘤 实验检测细胞增殖情况；实时荧光定量PCR检测细胞DNApol8lmRNA的表达。结果：与空载体组和对照组相比， 实验组 1和实验组2(转染 siRNA重组表达质粒)DNApol8lmRNA的表达显著下降(P0．05)，DNApol8l高表达组 中mRNA的表达显著升高 (P0．05)；实验组 1、实验组2和DNApol8l高表达组细胞周期 s期比例显著增加 (P 0．05)，肿瘤重量亦显著增加 (P0．05)。结论：DNApol8l的高表达和过低表达，都会增加细胞的遗传不稳定性。 可能在食管癌的发生中起一定作用。 【关键词] 食管肿瘤；DNA聚合酶 B；RNA干扰；siRNA表达载体 [中图分类号] R735．1 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2010．002 RegulationofDNApolymeraseI3Iexpressioninesophagealcarcinomacell lineEC9706 WANG Tao ，DONG Zi—ming ，ZHAO Guo—qiang (MedicalGeneticInstituteofHenanProvincialPeoplesHospital，Zhengzhou450003，China；CollegeofBasicMedcial Sciences，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450052，China．E—mail：dongzm@础 ．edu．cn) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheinfluenceofDNApolymeraseB(DNApol8l)onthebiologicalcharacteris— ticsofesophagealcarcinomacells．METHODS：siRNAexpressionplasmidtragetingDNApol8lwasconstructedandtrans— fectedintoEC9706cells．ThepositivecolonieswerescreenedbyCA 18selection．TheproliferationofEC9706cellswasde— tectedbyflowcytometryandnudemicexenograftmode1．TheexpressionofDNApol8lwasdetectedbyreal—timePCR． RESULTS：Comparedtoemptyvectorgroupandcontrolrgoup，theexpressionofDNApol8lwas significantlyreducedin thecellstransfectedwithsiRNAexpressionplasmidpSINsi—hU6一siRNApo181288(experimentalgroup1)andthecells transfectedwithsiRNAexpressionplasmidpSINsi—hU6一siRNApol8l814(experimentalrgou