人股动脉粥样斑块中血小板源性生长因子与胰岛素样生长因子-I的表达及分布差异.pdfVIP

维普资讯 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2008，24(5)：1025—1027 · 1025 · [文章编号] 1000—4718(2008)05— 1025—03 人股动脉粥样斑块中血小板源性生长因子 与胰岛素样生长 因子 一I的表达及分布差异 张大伟 ， 金 星。， 张立燕 (山东中医药大学附属医院，山东 济南 250011；山东省立医院，山东 济南250021； 山东济南槐荫区医院，山东 济南 250014) [摘 要] 目的：观察血小板源性生长因子 A链 (PDGF—A)、胰岛素样生长因子一I(IGF—I)在动脉粥 样硬化斑块中的表达及分布差异，探讨两者在动脉粥样硬化发展过程中的作用。方法：应用免疫组织化学技术测 定31人股动脉粥样斑块中同一部位PDGF—A、IGF—I的表达。结果：闭塞性动脉硬化症患者股动脉粥样斑块中 两种生长因子均呈强阳性表达，而正常人动脉壁中两者仅在中膜有微量表达，两者 比较有显著差异，但两种因子之 间比较无明显差异。在分布特点上，两种生长因子主要分布在平滑肌细胞密集的部位，即新生斑块区，但又有不 同，PDGF—A在泡沫细胞区域也有分布，IGF—I在泡沫细胞区域仅有少量分布。结论：PDGF—A和 IGF一1在动 脉粥样斑块中的表达增高与AS及ASO的发生密切相关 ；其分布区域 的差异与其表达细胞 的种类不同有关，但都 主要由增殖的平滑肌细胞表达。 [关键词] 血小板源性生长因子；胰岛素样生长因子 I；动脉硬化 ，闭塞性 [KEYWORDS] Platelet—derivedgrowthfactor；Insulin—likergowthfactorI；Arteriosclerosis，obliterans [中图分类号] R363 [文献标识码] A 闭塞性动脉硬化症 (arteriosclerosisobliterans，ASO)是动 2 试剂 脉粥样硬化 (arteriosclerosis，AS)病变在肢体动脉的局部表 PDGF—A、IGF—I单克隆抗体 、SABC试剂盒均购 自北 现，在AS以及血管重建手术后动脉再狭窄的病理发展过程 京中山生物工程公司。 中，血管平滑肌细胞 (vascularsmoothmusclecells，VSMCs)的 3 方法 异常增殖是非常重要的病理基础。既往认 为，PDGF—A、 选取动脉标本中最狭窄的部位，4％多聚甲醛固定24h， IGF—I对 VSMCs都有明显的促增殖作用，但何种生长因子 上行梯度乙醇脱水，标本保存于70％的乙醇中备用 ，最后标 在增殖过程中发挥更重要的作用是正在争论的问题。 目前 本常规石蜡包埋切片，一个部位连续切取切片3张，分别进行 的多数研究限于生长因子在AS动物模型或者离体培养的人 HE染色和免疫组织化学染色。 主动脉平滑肌细胞中的表达及其对VSMCs影响，ASO患者肢 3．1 HE染色 将石蜡标本切片脱蜡至水，水洗后，苏木素浸 体动脉中生长因子的表达情况及分布特点鲜有报道 ，本研究 染 10min，10％盐酸乙醇分化 10S，0．5％氨水返蓝，伊红浸染 3 通过检测31例ASO患者肢体动脉粥样斑块中同一部位 2种 — 6min，上行梯度乙醇脱水，二甲苯透明后中性树脂封片。 生长因子的表达，对此进行探讨。 3．2 免疫组织化学检验 采用 SABC法 ，将石蜡标本切片脱 蜡 ，枸橼酸钠抗原修复液微波修复 10min，冷却至40℃左右， 材 料 和 方 法 滴正常血清封闭，滴PDGF—A、IGF—I单克隆抗体 (工作液 1 一般资料 浓度 1：200)，置4℃湿盒过夜，依次滴 Ⅱ抗 、Ⅲ抗 ，DAB显色， 实验分为两组 ：ASO组与正常对照组。ASO组动脉标本 上行梯度乙醇脱水，二 甲苯透明后中性树脂封片。2组设对 取 自A