人类肾上皮细胞氧化损伤模型的建立.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(1)：189—192 · l89 · [文章编号] 1000—4718(2012)0l一0189—04 人类肾上皮细胞氧化损伤模型的建立 彭 花 ， 邓穗平 ， 谈 金 ， 蒋建伟 ， 欧阳健 明 (暨南大学 生物矿化与结石病防治研究所 ，医学院，广东 广州510632) [摘 要] 目的：采用过氧化氢 (H：0：)对人类肾脏近端小管上皮细胞系(HKC)进行氧化损伤，建立损伤的 细胞模型。方法：通过检测细胞活力、培养基中的丙二醛(MDA)含量和细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化 研究细胞损伤的程度；利用激光共聚焦显微镜观察细胞损伤前后骨桥蛋白(OPN)表达水平 的变化；采用扫描电子 显微镜(SEM)观察细胞损伤前后形貌和膜表面微结构的变化。结果：用 1mmol／LH：0：作用HKC不同时间后，细 胞活力和SOD活性逐渐下降，MDA释放量增加，OPN表达量显著增加并在作用时间为 1h时达到最大值 ；经损伤 后的细胞变得干瘪收缩，且膜表面粗糙，鞭毛、突触大部分断裂脱落。结论：H：0：能够明显损伤HKC，细胞损伤 后 ，其活力和膜表面超微结构发生变化，并在膜上表达能黏附草酸钙晶体的OPN。因此，可用 1mmol／LH：0：作用 HKC1h建立损伤模型。 、 [关键词] 肾小管上皮细胞；细胞损伤；肾结石 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．01．038 Anoxidativeinjurymodelofhumankidneyepithelialcells PENG Hua ，DENG Sui—ping ，TAN Jin ，JIANG Jian—wel～，0U —rANG Jian一 · l mlng (InstituteofBiomineralizationandLithiasisResearch，SchoolofMedicine，MnUniversity，Guangzhou510632，China． E—mail：toyjm@ “．edu．cn) [ABSTRACT] AIM ：Toestablishaninjuredcellmodelusinghumankidneyproximaltubuleepithelialcellline (HKC)tomimictheoxidativeinjurybyhydrogenperoxide(H202)．METHODS：Thecellviability，thecontentofma— londialdehyde(MDA)intheculturesupernatantandtheactivityofintracellularsuperoxidedismutase(SOD)weredetec· tedtoinvestigatethedegreeofcellinjury．Osteopontin(OPN)expressedonthecellmembrnaesurfacewereobservedby laserconfocalmicroscopybeforeandaftercellinjury．Thechangesofcellularmorphologyandtheuhrastructureofmen- braneSurfacewereobservedunderscanningelectronicmicroscope．RESULTS：AfterHKCcellsweretreatedwithH2O2at theconcentrationof1mmol／Lfordifferenttime，thecellviba ilityand theactivityofSOD decreased andthecontentof MDAincreased．TheexpressionlevelofOPNsignificnatlyin