人脐带间充质干细胞向Raji细胞迁移并促进其增殖的研究.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2013，29(1)：93-98 · 93 · [文章编号] 1000-4718(2013)01—0093—06 人脐带间充质干细胞 向Raji细胞迁移 并促进其增殖的研究 赖 菁 ， 刘革修 ，祝爱珍 ， 陈盛亭 (暨南大学 第一临床医学院，医学院血液病研究所，广东广州 510632) [摘 要】 目的：体外研究人 Burkitt淋巴瘤细胞系Raji细胞和人脐带间充质干细胞(humanumbilicalcord mesenehymalstemcells，hUC-MSC)间的相互作用，探讨 MSC在恶性肿瘤治疗中的潜在应用前景。方法：将 Raji细 胞和hUC—MSC进行直接接触和非接触共培养 ，观察MSC对 Raji细胞的作用，采用 CCK-8法观察Raji细胞的增殖 情况，流式细胞术检测Raji细胞周期的变化，同时应用siRNA干扰技术分析血管内皮生长因子(VEGF)在MSC向 Raji细胞迁移过程中的作用(即用 siRNA阻断Raji细胞VEGF的表达)，ELISA法检测 Raji细胞培养上清VEGF的 分泌量，qRT-PCR法检测Raji细胞 VEGFmRNA表达的变化。结果：MSC及其条件培养基 (MSC—conditionedmedi． um，MSC—CM)均促进 Raji细胞的增殖，72hMSC-CM培养的Raji细胞增殖活性为0．99±0．05，而对照组为0．71± 0．07(P0．01)。无论是直接接触还是条件培养基均促使 Raji细胞从 Go／G 期向s期的转化，MSC-CM的作用尤 其明显，S期的细胞数 目由16．33±1．37增加到28．50±1．41，而Go／G 期细胞数 目则由77．70±1．57下降到54．40 ±1．57(P0．01)。siRNA干扰Raii细胞后，VEGF无论是在蛋白水平还是mRNA水平都明显下降，且MSC向Raji 细胞的趋化能力也显著降低(96．O0±5．28 143．O0±7．20，P0．O1)。结论：MSC具有向Raji细胞趋化的作用， 其机制与Raji细胞分泌VEGF呈正相关；MSC可促进Raji细胞从Go／G 期向s期转化，从而促进Raji细胞的增殖。 [关键词] 人脐带间充质干细胞 ；Raji细胞；血管内皮生长因子 [中图分类号] R363 [文献标志码] A do~：10．3969／j．issn．1000-4718．2013．01．015 Humanumbilicalcordmesenchymalstem cellsmigratetoRajicellsand promotetheirproliferation LAIJing ，UU Ge—xiu ，ZHUAi-zhen ，CHEN Sheng—ting (‘ FirstClinicalCollege，InstituteofHematology，SchoolofMedciine， 加nUnweni@，Guangzhou510632，China．E— mail：chenshengting@tom．com) IABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheinteractionbetweenhumna BurkittlymphomacelllineRajiandhuman umbilicalcordmesenehymalstemceHs(hUC．MSC)．METHODS：ThedirectandindirecteffectsofMSConRajicells wereinvestigated．TheviabilityofRajicellswastestedbyCCK-8assay，andthecellcyclewasdeterminedbyfloweytome． try．Theimportanceofvascularendothelialgrowthfactor(VEGF)inthemigrationofMSC