人受体活性修饰蛋白1基因修饰的骨髓间充质干细胞移植对兔血管成形术后新生内膜的影响.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(4)：675—682 · 675 · [文章编号] 1000—4718(2012)04—0675—08 人受体活性修饰蛋白1基因修饰的骨髓间充质干细胞 移植对兔血管成形术后新生 内膜的影响 龙仙萍，赵然尊，石 蓓 ，许官学 (遵义医学院第一附属医院心血管内科 ，贵州 遵义 563003) [摘 要] 目的：探讨人受体活性修饰蛋白1(hRAMP1)基因修饰的骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对动脉粥 样硬化模型兔颈动脉球囊成形术后新生内膜增殖的影响。方法：密度梯度离心法加贴壁培养法获得 MSCs，并以携 带hRAMP1的腺病毒转染 MSCs获得hRAMP1基因修饰的MSCs(hRAMP1一MSCs)。建立动脉粥样硬化狭窄并球 囊损伤血管成形术的兔模型，随机分为 hRAMP1一MSCs组、MSCs组和对照组，模型建立成功后经耳缘静脉分别注 射携带pAd2一EGFP—hRAMP1或 pAd2一EGFP的MSCs和 PBS，于细胞移植后 7d、14d和28d分别处死动物取 材 ，观察 MSCs归巢、血管内皮化程度及内膜增生程度，同时检测血清血管内皮生长因子(VEGF)水平和血管局部 内皮型一氧化氮合成酶 (eNOS)表达。结果：细胞移植后不同时点hRAMP1一MSCs组和 MSCs组损伤血管增生 内 膜均有 CD31和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)分布，但以hRAMP1一MSCs组内皮化程度明显，MSCs组次之 ，两者与 对照组比较均有显著差异(P0．05)；细胞移植后不同时点hRAMP1一MSCs组和MSCs组内膜增生面积及再狭窄 率均低于对照组(P0．05)，尤以hRAMP1一MSCs组降低明显；细胞移植后不同时点hRAMP1一MSCs组和MSCs 组血清 VEGF水平和血管eNOS表达较对照组增加 (P0．05)，而 hRAMP1一MSCs组又明显高于 MSCs组 (P 0．05)；损伤血管新生内膜增殖细胞核抗原 (PCNA)阳性表达在 hRAMP1一MSCs组最少，对照组最多。结论： hRAMP1基因修饰的MSCs能更有效促进损伤内膜快速内皮化 ，重组hRAMP1腺病毒载体不影响MSCs向内皮细胞 分化潜能。基因联合干细胞治疗能更好地促进损伤动脉快速内皮化 ，降低血管成形术后再狭窄。 [关键词] 受体活性修饰蛋白1；间充质干细胞 ；新生内膜 ；再内皮化 ；血管成形术 [中图分类号] R543．5 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．．1000—4718．2012．40．017 EffectoftransplantationofhRAMPlgene—modifiedbonemarrow M SCs on posatngioplastyneointimaformation inrabbits LONG Xian—ping，ZHA0 Ran—zun，SHIBei，XU Guan—XUe (DepartmentofCardiology，TheFirstAffiliatedHospital，ZunyiMedicalCollege， n 563003，China．E—mail：shi— bei2147@163．con) [ABSTRACT] AIM：Toexploretheeffectoftransplantationofhumna receptoractivity—modifyingprotein1 (hRAMP1)gene—modifiedbonemagfowmesenchymalstemcells(MSCs)onneointimaformationaftercarotidballoonall- gioplastyincarotidatherosclerosisrabbits．METHODS：MSCswerecollectedthroughdensitygradientcentrifugationnad adherentculture．MSCswere~ansfeetedwithadenovirusve