同型半胱氨酸硫内酯损伤血管内皮细胞的机制研究.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiolo~ 20l1，27(10)：1879—1884 · 1879 · [文章编号】 1000—4718(2011)10—1879—06 同型半胱氨酸硫 内酯损伤血管内皮细胞的机制研究术 刘玉晖 。 游 宇 (江西中医学院药学院药理学教研室，江西 南昌330004；南昌大学附属第一医院消化内科 ，江西 南昌330006) [摘 要] 目的：在体外培养的内皮细胞中探讨同型半胱氨酸硫 内酯(HTL)致血管内皮细胞损伤作用及其 机制。方法：体外培养的人脐静脉内皮细胞，与不同浓度的HTL孵育，用 ELISA检测 内皮细胞中肿瘤坏死 因子 O,／ (TNF一0)【和可溶性细胞间黏附分子(slCAM)一1的浓度，荧光显微镜检测活性氧簇 (ROS)的含量、核转录因子 KB (NF—Ks)的激活及IKBct蛋白表达 ，同时检测内皮细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)漏出量与一氧化氮(NO)水平。结 果：HTL(1mmol／L)孵育内皮细胞3h后显著增加细胞 ROS含量 ，刺激NF—KB转入胞核而活化，孵育细胞24h后 明显升高细胞上清液中slCAM一1和TNF—Ot浓度；降低细胞活力和NO的水平，增加 LDH的漏出量。抗氧化剂 NAC、NADPH氧化酶抑制剂Apocynin和NF—KB抑制剂PDTC可显著抑制HTL所致ROS含量的增加以及NF—KB 激活，降低HTL刺激的培养液中slCAM—l和TNF一 的浓度，增加培养液中NO水平。结论：HTL诱导的血管内 皮细胞功能损伤的机制可能与诱导氧化应激以及NF—KB活化有关。 【关键词] 同型半胱氨酸硫内酯；人脐静脉内皮细胞；NF—KB；活性氧 [中图分类号] R363 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．10．005 Homocysteinethiolactonedamagesculturedendothelialcells UU YU—hui．YOU Yu (DepartmentofPharmacology，CollegeofPharmacy，JiangxiUniversityof TraditionalChineseMedicine，Nanchang 330004，China ；DepartmentofDigestiveMedciine，TheFirstAffiliatedHospital，NanchangUniversity，Nanehang330006， China．E—mail：yuhuiliu77@126．com) [ABSTRACT] AIM：Toapproachthemechanismsofhomocysteinethiolaetone(HTL)一induceddamageinendo— thelialcells．METHODS：Humna umbilicalveinendothelialcells(HUVECs)wereincubatedwithHTL．Theconcentra— tionsofsolubleintercellularadhesionmolecule(sICAM)一1andTNF一仅intheconditionedmediumweremeasuredby ELISA．TheactivityofNF—KBandthelevelofROSweredeterminedbyfluorescencemicroscopy．Cellviability，activityof lactatedehydrogenase(LDH)andcontentofnitricoxide(NO)inthemediumwerealsodetected．RESULTS：Exposure 0fHUVECstoHTLatconcentrationof1mmol／L for3hpo tentiatedtheactivityofNF—KB na dincreasedthelevelof ROS．IncubationofHUVECswithHTL(1mmol／Lfor24h)markedlydecreasedthecellviabilit