同种异型抗原冲击不成熟CD8α＋DCs抑制T细胞增殖的体外实验.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2010，26(11)：22o2—2206 [文章编号] 1000-4718(2010)11—2202一o5 同种异型抗原冲击不成熟 CD8 +DCs抑制 T细胞增殖的体外实验 陈 康 。 曹开源 ， 徐 霖弘， 吴耀良 ， 袁广卿 ， 张 甜 ， 傅 强 (’中山大学第一附属医院黄埔院区检验科，广东 广州510700；中山大学临床检验标准化研究中心， 中山大学中山医学院 ’免疫学教研室，微生物教研室，广东广州 510080) 【摘 要】 目的：探索同种异基因抗原体外冲击后小鼠优势不成熟CD8ct树突状细胞(DCs)体外抑制T细 胞增殖的最佳条件。方法：取SPF级C57BL／6(H一2b)小鼠的骨髓细胞，GM—CSF+IL一4+SCF+Fh3L诱导制 备优势不成熟CD8a DCs，于培养最后 Id加入梯度蛋白浓度(O、2．5、5、10和20mg／L)同种异基因(H一2d)小鼠 脾细胞抗原冲击DCs。经抗原冲击后的DCs分别与同系T细胞按 1：1、2：1、4：1比例共培养 ，MTF法观察T细胞增 殖情况。ELISA法检测上清中细胞因子(IFN一^y和IL—lO)的含量。以GM—CSF+IL一4+rrNF—ot诱导的成熟 DCs作为对照。结果：优势不成熟CD8ctDCs与T细胞 1：1共培养时不能有效刺激T细胞增殖，与2：1及4：1组相 比刺激能力最弱(P0．05)；上清中IFN一．y的分泌明显低于成熟DCs对照组 ，且经小剂量抗原(2．5mg／L)冲击 时IL一1O的分泌高于对照组。结论：经小剂量 (2．5rag／L)同种异基因抗原冲击后的优势不成熟CD8 ’DCs，与T 细胞 1：1混合，是抑制T细胞增殖的最佳条件。 【关键词】 树突状细胞；移植物抗宿主病；T淋巴细胞 [中图分类号] R318．06 【文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2010．11．023 Allogeneicantigen—pulsedmurineimmatureCDSa dendriticcellspre- ventT —cellsproliferation ／nvitro CHEN Kang ，CAO Kai—yuan ，XU Lin ，WU Yao—liang ，YUAN Guang—qing2 ， ZHANGTian．FUQiang4 (’ClinicalLaboratory，HuangpuDistrictof First z HospitalofSunYat—senUniversity，Guangzhou510700， China；ResearchCenterforClinicalLaboratoryStandard，SunYat—senUniverstiy；DepartmentofImmunology，Depart- meritofMcirobiology，ZhongshanMedicalSchool，SunYat—senUniverstiy，Guangzhou510080，China．E—mail：xulin@ mail．sysu．edu．cn) [ABSTRACT] AIM：ToexploretheoptimalconditionofpredominantimmatureCD8a dendriticcells(predo— iDCs)preventingT—cellproliferationpulsedbyallogeneicnatigen．METHODS：Predo—iDCs，inducedwithGM—CSF +IL一4 +SCF+Fh3LfromSPFhealthyC57BL／6murinebonemarrowcells，werepulsedbydifferentdoses(0，2．5， 5，10and20mg／L)ofallogeneiemurine