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业生物技术学报 Journal of Agricultural Biotechnology 2006,14 (6): 922~925
·研究论文·
向日葵种子特异性启动子 的克隆及其功能验证*
郝彦玲,朱本忠,栾春光,刘宽庆,罗云波**
,
( 中国农业大学食品科学与营养工程学院 北京 100083)
:
摘要 利用PCR 技术从向日葵( L.) 基因组DNA 中克隆了Lea 蛋白基因家族中 基因上游
1414 bp 的调控序列。序列分析表明 1~ 1414 bp 与报道序列同源性 100% ,将其与 基因融合构建植物表达载体后,通过根癌
-
杆菌( )介导法转化烟草( )NC89 ,PCR 扩增初步证明目的片段已整合到烟草基因
组中,转基因植株的GUS 活性检测表明,在茎、叶中无GUS 活性,只存在于种子中。 基因上游 1 4 14 bp 片段具有种
子特异性启动子的功能。
: ;
关键词 向日葵;种子特异性启动子 GUS 染色;烟草
: : :
中图分类号 S188 文献标识码 A 文章编号 1006-1304(2006 )06-0922-04
Cloning and Identification of Sunflower Seed-specific Promoter
HAO Yan-ling ,ZHU Ben-zhong ,LUAN Chun-guang ,LIU Kuan-qing ,LUO Yun-bo **
The 1 4 14 bp 5 flanking sequence of gene, a late embryogenesis abundant gene of L.,
was cloned by PCR. The similarity compared with the reported sequence was 100% . The promoter was fused to the
gene to construct plant expression vector, which was transferred into tobacco NC89 by
-mediated method. PCR results showed that the promoter had been integrated into genomic DNA of tobacco ( )
successfully. GUS activity assays indicated that expression of GUS was active only in transgenic tobacco seeds. However, the GUS ac-
tivity didnt exist in the stems and leaves. So, the 1 4 14 bp 5 flanking sequence of gene is seed-specific promoter.
.; seed-specific promoter; GUS staining; tobacco
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