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无创评估精子形态新技术%3a拉曼光谱扫描精子的初步研究.pdf

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实验室研究 综上所述,由于拉曼光谱分析,无需破坏样品,能直接对精子形态与功能进行无损鉴别,这对精子 的DNA分子结构.以及和DNA与其他分子间的作用研究特别重要。拉曼光谱作为一种无损伤的 生殖细胞评估技术,对临床有重大的研究价值,可望成为精子形态与功能的新的无创评估技术。 【关键词】甲基化;断头精子;拉曼光谱; WH05所建议人类精液体积称重法存在缺陷与不足 施文博1胡洪亮1肖玉芳1王如瑶1刘勇1李铮l掌(掌通信作者) 1上海交通大学医学院附属仁济医院泌尿外科,1上海市男科学研究所精子发育与遗传学实验室,l 上海市人类精子库,(200001) 【摘要】 【目的】探究称量法是否适用于精液体积的测定,确立正常生育力男性精液的密度范围,为精子 库常规精液分析提供直观可靠的筛选标准。 【资料与方法】186例精液标本均来自上海市人类精子库的合格捐献者,其均符合2003年卫生部 修订的《人类精子库基本标准和技术规范》。年龄22—35岁,平均(23+3.5)方差岁,按要求禁欲3— 5d,手淫取精于已灭菌的广口杯内。比较三种方法体积的测量方法的准确性和实用性。方法一(精 确称量法):37℃液化后,用可调量程式微量移液器吸取lml精液,装入标准的加盖量杯后称重, 将结果减去多次测量空杯质量的平均值,即为精液的质量,可计算出精液的密度。利用密度与称 量法的质量进行换算得出精液体积值。方法二(称量法):根据WH05手册上以精液密度为lg/ml, 称量好的精液质量来换算出精液体积。方法三(针管法):利用5ml无菌注射器对精液进行吸取来 测量精液的体积。通过配对样本t检验分别三种方法差异。然后用移液器在精子计数板(Makler Thome chamber)q日加入5¨l完全液化并充分混匀后的精液,在CASA(Hamilton Re2search,Beverly MA,美国)系统上检测,计算5个视野的精子数量,得到精子的浓度。使用SPSS13.0统计分析软 件进行数据处理,分析精液密度和精子浓度之间的相关性。 无显著性差异。根据志愿供精者的精液测得精液密度在1.01一1.02(g/m1)之间,精液的密度与精子 的浓度有一定的相关性。 【结论】WH05精液分析手册推荐精液密度为lg/ml。而本实验发现高精子浓度的精液密度大于 lg/ml,如果使用称重法测定精液的体积,会形成比较大的误差。应该增加更多的样本来建立一个 精液密度的数学模型,更准确又方便测定精液体积。 【关键词】精液体积;WH05;称重法 一llo_ 无创评估精子形态新技术:拉曼光谱扫描精子的初步研究 作者: 朱勇, 刘锋, 何琳, 冯锡武, 施文博, 刘勇, 胡洪亮, 黄翼然, 李铮 作者单位: 朱勇,刘锋,冯锡武,施文博,刘勇,胡洪亮,黄翼然,李铮(上海交通大学医学院附属仁济医院泌 尿外科 上海市男科学研究所精子发育与遗传学实验室 上海市人类精子库), 何琳(上海交 通大学分析测试中心 200001) 引用本文格式:朱勇.刘锋.何琳.冯锡武.施文博.刘勇.胡洪亮.黄翼然.李铮 无创评估精子形态新技术:拉曼光谱扫 描精子的初步研究[会议论文] 2012

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