复合酶法提取板党多糖地的研究.pdfVIP

2009 MEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCHVOL．20NO．8 时珍国医国药2009年第20卷第8期LISHIZHEN 复合酶法提取板党多糖的研究 周大寨1，朱玉昌1，黄卫2，张弛H (1．生物资源保护与利用湖北省重点实验室(湖北民族学院)，生物技术研究所，湖北恩施445000； 2．湖北省恩施州产品质量监督检验所445000) 摘要：目的将现代酶解技术应用于板桥党参多糖的提取，筛选出最佳提取工艺。方法以板党多糖得率为指标，先考察木 瓜蛋白酶、纤维素酶和果胶酶各自最适当的酶用量、酶解时间、酶解pH及酶解温度，再通过正交实验和方差分析确定复合 酶法提取板党多糖的最佳条件。结果在木瓜蛋白酶、纤维素酶和果胶酶的酶用量分别为90，90，150U／g干粉复合下， pH5．0、500C酶解90min，板党多糖得率最高，达26．47％。结论采用酶解辅助提取板党多糖，可以明显提高多糖的提取率。 关键词：板党；多糖；复合酶 中图分类号：R284．2文献标识码：B 文章编号：1008-0805(2009)08—1928-02 党参RadixCodonopsis是我国传统常用中草药，为中药“八3结果 参”之首，具有补中益气、和胃养血等功效，其中党参多糖作为主 3．1单酶酶解条件的确定 要的药物活性成分，一直是党参品质鉴定的主要指标，其能提高 3．1．1最适酶用量的确定准确称取0．2g样品6份，分别放入 小鼠脑SOD活性，降低MDA含量，有助于清除体内自由基，且能具塞三角瓶中，加蒸馏水100 ml，调pH6．0，依次分别加入酶用量 提高机体的免疫能力，可以抗衰老¨。J。本研究以板桥党参(简0，30，60，90，120，150U／g干粉，50℃恒温水浴浸提120min后迅 称“板党”)为原料，利用酶法技术提取板党多糖，以提高多糖的 速升温至90℃火酶10 min，流动水冷却至室温，离心，醇析，除蛋 得率，提高产品的科技含董及附加值，为进一步开展其药用及保 白，测多糖含量，计算多糖得率。结果见图1。 健方面的开发应用奠定基础。 1材料与仪器 1．1材料板桥党参，由恩施市峰岚板桥党参有限公司提供，实 验室纯化。 1．2仪器与试剂TU一1810紫外可见分光光度计(北京普析通 一-)|哥靶嚣帷 用仪器有限责任公司)；pHSJ一4A型实验室pH计(上海精密科 学仪器有限公司)；HWSl2型电热恒温水浴锅(上海一恒科技有 盯孙拍M∞让叭∞ 0 30 60 90 120 150 限公司)；$21—3磁力搅拌器(上海司乐仪器厂)；DL6MB型大容 群用量c，u(g干粉)1 量冷冻离心机(长沙科威实业有限公司)。 图1 不同酶用量多糖得率 木瓜蛋白酶(国药集团化学试剂有限公司，酶活6000U／ 由图1可见，添加木瓜蛋白酶、纤维素酶及果胶酶在一定程 mg)；纤维素酶(国药集团化学试剂有限公司，酶活15000U／g)；