珊瑚藻藻红蛋白α亚基脱辅基蛋白基因克隆和序列分析.pdfVIP

业生物技术学报 Journal of Agricultural Biotechnology 2004,12 (6): 733~734 ·研究简报· 珊瑚藻藻红蛋白 亚基脱辅基蛋白基因克隆与序列分析* 盛 钟伏弟 吴祖建 林奇英 谢联辉** （福建 林大学植物病毒研究所，福州350002 ） 关键词: 珊瑚藻；藻红蛋白基因； 亚基 Cloning and Sequence Analysis of Subunit of Phycoerythrin Gene from WANG Sheng ZHONG Fu-Di WU Zu-Jian LIN Qi-Ying XIE Lian-Hui** (Institute of Plant Virology, Fuji an Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002,China) ; phycoerythrin gene; subunit ; sequence analysis 藻胆体是红藻的光合作用捕光器官。藻红蛋白位于藻胆 PCR扩增仪为Whatman Biometra T3 ，反应体系20 滋L。 体的尖端，在能量传递体系中位于第一环节，是第一级捕光 条件为95 ℃预变性5 min ，之后95 ℃ 80 s ，56~42 ℃ （每降 色素，直接吸收和传递光能，对藻体的生理活动有重要影响 低2 ℃作2 个循环，片段Gsp2-P5 ）或62 ℃（片段P 1-P2 ） [1]。藻红蛋白的光吸收区位于蓝绿光区（498~565 nm ），可以 120 s ，72 ℃80 s ，循环30 次后72 ℃延伸 10 min。PCR 扩增产 利用高等植物不能利用的光能。如能通过基因导入而将高等 物经回收纯化，克隆到pGEM-T easy 载体上，经蓝白斑筛选、 植物的光合作用器加以改造，使其光吸收范围扩大，可大大 碱裂解法提取质粒, 酶切鉴定。由上海生工生物工程有限公 [2] 地促进高等植物的生长发育 。此外，藻红蛋白是一类丰富的 司进行序列测定。 天然蛋白质资源，在深入研究藻红蛋白基因结构和功能的基 2 结果和分析 础上，利用基因工程手段获得高效表达的基因工程菌株，可 [3] 以通过发酵生产藻红蛋白 。同时亦可利用藻红蛋白的基因 2.1 序列测定与分析 [1] 对大型经济海藻进行基因功能改良 。本研究利用TD-PCR 序列长905 bp ，包括 亚基编码区的309 bp （编码 102