美丽镰刀菌和固定化东北红豆杉的共生培养.pdfVIP

中国生物工程杂志 　Ch ina B iotechno logy, 2008, 28 ( 8) : 84 ～90 美丽镰刀菌与固定化东北红豆杉的共生培养 1 1, 2 1 2 周玉洁 　程 　龙 　陶文沂 　周 　红 ( 1 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室 　无锡 　2 14 122　2 无锡卫生高等职业技术学校 　无锡 　2 14 111) ( ) ( ) 摘要 　采用固定化培养法模拟东北红豆杉 Tax us cusp ida te 和美丽镰刀菌 F usa rium m a irei K178 的共生环境 ,对其相互作用进行初步研究以期提高各 自紫杉醇产量 。共培养条件为 :海藻酸钠浓 度 2 % (M /V ) , T. cusp ida te细胞包埋量 0. 15 g/m l, CaC l 浓度 4 % (M /V ) ,凝胶直径为 3 ～3. 5 2 mm ,钙化 0. 5h , 以 40m l接种量接入装液量为 70m l/250m l摇瓶的改良M S培养基 , 25 ℃、160 r/m in ( ) 振荡黑暗培养 ,第 9d接入 10% V /V 对数期的 F. m a irei, 10d后收获 。结果表明 , F. m a irei对 T. cusp ida te细胞的生长有强烈抑制作用 , 能诱导紫杉醇等次生代谢物向胞外分泌 ; F. m a irei 与 T. cusp ida te 的相互作用对共生培养物的紫杉醇产量也有显著影响 。 关键词 　美丽镰刀菌 　东北红豆杉 　固定化 　紫杉醇 　共培养 中图分类号 　Q 814. 2 　　产紫杉醇的红豆杉内共生菌的发现 , 是紫杉醇资 　　凝胶包埋法可使植物细胞免受剪切力 , 与培养环 源研究的重要进展 。本实验室从中国南方红豆杉中分 境隔离 ,有利于细胞组织化及分化 ,提高次生代谢产物 ( ) 的合成能力和稳定性 。本研究通过红豆杉植物细胞固 离到一株产紫杉醇的美丽镰刀菌 F usa rium m a irei ,并 ( ) 定化模拟植物和 内共生真菌的协同生长 , 以期在保持 获得国家专利 ZL200510038424. 8. 2006 。但 目前产 量尚不能满足工业化生产的要求 。 两者细胞活力的条件下研究促进各 自紫杉醇产量提高 　　内共生菌长期与宿主协同进化并形成了互惠互利 的作用机制 。 的共生关系 。Zhang等 [ 1 ] 的研究显示 , 内共生菌能够参 1　材料与方法 与植物活性成分的合成或者转化 ;还有研究证明,红豆 杉内共生真菌产生的诱导物能限制植物细胞生长 , 促 1. 1　实验材料 进紫杉醇合成与分泌 ; 植物产生的诱导物也可促进 内 　　F usa rium m a irei K178,本实验室保存 。斜面采用沙 共生真菌的紫杉醇合成与分泌 [ 2 ] 。因此 ,模拟 内共生