丹参多酚酸B对动脉粥样硬化大鼠OX40OX40L免疫通路研究.pdfVIP

758 陕西 中医2012年第 33卷第 6期 丹参多酚酸B对动脉粥样硬化大 鼠OX40／OX40L免疫通路研究 陈昕琳 章怡神 顾仁樾 上海中医药大学附属龙华医院 (上海200032) 摘 要 目的：研 究丹参 多酚酸B对动脉 粥样硬化大鼠OX40／OX40L免疫通路的影响作用。方法： 八周龄雄性 SD大鼠60只，随机分成 6组 (正常组、模型组、丹参多酚酸B低剂量组、中剂量 组、高剂量组、辛伐他汀组)，并给予相应的处理。结果：各用药组 OX40mRNA表达水平明 显高于正常组，(P0．05)与模型组 比较，丹参多酚酸B低剂量组、中剂量组 以及辛伐他汀 组 ()X40mRNA表达明显下调 (Pd0．05)，各用药组 OX40LmRNA表达水平明显高于正常 组，(Pd0．05)；，丹参 多酚酸B中剂量组以及辛伐他汀组OX40LmRNA与模型组比较明显 下调 (P0．05)；模型组以及丹参 多酚酸 B各剂量组的 ()x40的蛋 白表达水平明显高于正 常组 (P0．05)；丹参 多酚酸B中剂量组 以及高剂量组的OX4O蛋 白水平明显高于模 型组 (P0．05)。丹参多酚酸 B中剂量和高剂量组的OX40L的蛋 白表达水平明显高于正常组 (P0．05)。结论 ：丹参 多酚酸B可以明显下调 OX40／OX40LmRNA水平 ，提示丹参 多酚 酸B可能通过调节 OX4oloX40L信号通路抑制动脉粥样硬化炎症免疫反应。 主题词 丹参 ／药理学 丹参 多酚酸B／药理学 动脉粥样硬化 ／治疗应用 @ OX40 @OX4OI 【中图分类号】 R965 【文献标识码】 A 【文章编码1 1000—7369(2012 动脉粥样硬化 (atherosc1erosis，AS)是心脑血管病 的主要 应用 Trizol提取液常规提取细胞 的总 RNA，分光光度计 病理基础 。目前关于 AS的病 因较一致 的看法是 ，由损伤 、炎 测定 A260／A280。RTPCR采用 Primer3在线软件设计 引物 ， 症、免疫功能障碍三者相结合作用 的结果 。近年来 ，OX4O／ 内参基因以GAPDH为参照，各基 因引物和 PCR扩增产物长 OX40L作为一种新的免疫炎症系统，与动脉粥样硬化 的关系 度如表 1所示。采用生物 电泳 图像分析系统计算各基冈电泳 开始受到越来越多的关注。关于 AS的中医病机 ，结合 AS炎 条带的光密度值 ，基 因相对表达量一 目的基因 mRNA光密度 症学说所提及 的各种病因及介质 ，我们认为与中医毒邪致病论 值 ／内参基 因mRNA光密度值。 的病 因病机一致 ：毒邪致病 ，因毒而成痰成瘀 ，毒 、痰 、瘀三者相 表 1 RTPCR检测基 因引物序列及产物长度 互促生 ，形成恶性循环 ，以毒为引发关键 ，以痰 、瘀为有形之病 灶 。本研究以丹参多酚酸 B(SalB)为研究对象，探讨其 “活血解 毒一抑制免疫炎症反应一抗动脉粥样硬化”的可能机制 。 1 实验材料 1．1 材料 1．1．1实验动物 八周龄雄性 SD大鼠6O只，平均体质量 300g左右 ，由上海西普尔一必凯实 验动物有 限责任公司提供 (SCXK(沪。 1．2 实验药物 丹参多酚酸 B：由中国科学院提供 ，分子 式 C36H28MgO16。辛伐他汀 (舒 降之)：杭州默沙东制药有限 公司生产 ，批准文号 20rag／片。 1．3 实验仪器 冷冻台式离心机 、增力电动搅拌匀浆机、 FA2004N型 电子天平 、石英 比色皿及紫外可见分光光度计 2．3主动脉 OX40／OX40I蛋 白测 定 (WesternBlot法) (752s型)、EIx50型 自动洗板机 、超低温冰箱等。 取适量主动脉组织(20mg左右)，做好蛋 白质样 品的制备 ，采取 2 方法 2．1 模 型 的建立和分组 八周龄雄性 SD大 S聚丙烯酸 胺凝胶 电泳 (SDSPAGE)将 蛋