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卡那霉素和速尿联合用药后的毛细胞死亡.pdf

!!!兰!! ! nalofHearingandSpeechRehabilitation 基『蕊研究I doi:10.3969~.issn.1672—4933.2013.03.008 卡那霉素和速尿联合用药后的毛细胞死亡水 TheDeath Duration andM odelofCochlearHairCellsinGuineaPigs aftertheCombinedAdm inistrationofKanam ycinandFurosem ide ■张贤芬 孙东绣 孙爱玲 杨仕明 ” 胡吟燕 郭 维 韩东一 ” ZHAN G Xian-fen.SUN Dong--xiu,SUN Ai—iing. YAN G Shi-m ing.HU Yin--yan.GUO Wei.ttAN Dong-yl 【摘要】目的 观察卡那霉素和速尿联合用药后豚 鼠耳蜗毛细胞的死亡 时程和方式 。方法 选用健康 成年 白色红 目豚 鼠,雌雄不限 ,随机分成健康对照组和药物致聋后6 h、9 h组 (实验组 ),每组5只。实验组 在选取的时 间点完成 听性脑干反应 (ABR)检测后行耳蜗基底膜铺 片 、PI荧光染色 ,共聚焦 显微镜下观察 毛细胞 。对 照组不做处理 。结果 实验组半数豚 鼠致聋 (ABR阂值95 dB SPL),致聋豚 鼠耳蜗可见外毛 细胞核 固缩和核肿胀 ,与给药6 h组相 比,给药9 h组外毛 细胞核肿胀数 目增 多。检 测给药6 h组~1:19 h组 豚 鼠末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺 口末端标记~ (terminaldeoxynucleotidyltransferase- mediated dUTP-biotin nick end labeling,TUNEL),没有观察到 阳性着色细胞 。正常对 照组所有豚 鼠ABR正常 ,其耳蜗各 回毛细胞没有 出现毛细胞核 固缩或者核肿胀 。结论 卡那霉素和速尿联合用药后 数小时即可导致豚 鼠耳蜗毛细胞死亡 ,毛细胞损害为两种类型,即坏死和凋亡 。 【关键词 】耳蜗 ;毛细胞 ;听性脑干反应 ;药物性聋 ;凋亡 ;坏死 [Abstract]ObjectiveToobservethedeathdurationandmodelofcochlearhaircellsinguineapigs aftertheadm inistrationofkanamycinandFurosem ide.M ethOdsHealthyadultwhiteguineapigsw ithred eyeswererandom ly selected withoutconsideration ofgender.These guineapigswererandom ly divided into 3 groupswith 5guinea pigsin each group,i.e.controlgroup,6 h afterdrug adm inistration group and 9 h afterdrug adm inistrationgroup.Afterreceiving ABR testatspecific time,the cochlearbasilar membraneoftheexperimentalgroup wasprocessed by stretchedpreparation techniqueand treated with fluorescentstaining.Thehaircellsw ereobserved undertheconfocalm icroscope.Thecontrolgroupwas untreated.ResultsHalfoftheexperimentalgroup hadhearinglossinducedby kanamycin andfurosem ide (ABR threshold 95 dB SPL).Thecochlearouterhaircellsoftheguineapigsshowednuclearpyknosis and swelling.Thereweremorecellswith swelling nucleusinthegroup9h afterdrug adm inistrationthan thegroup 6h afteradm inistration.NO positivecell

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