扶正化瘀方影响转化生长因子β1Smad信号通路的抗肝纤维化作用机制.pdfVIP

中西医结合学报 2012年 5月第 1O卷第 5期 JournalofChineseIntegrativeMedicine，May2012，Vo1．10，No．5 扶正化瘀方影响转化生长因子II1／Smad 信号通路的抗肝纤维化作用机制 王清兰 。，陶艳艳 ，沈丽 ，崔红燕 ，刘成海 1．上海 中医药大学曙光医院，上海中医药大学肝病研究所 ，上海 201203 2．上海市 中医临床重点实验室 ，上海 201203 3．上海 中医药大学肝 肾疾病病证教育部重点实验室 ，上海 201203 目的：探讨扶正化瘀方影响转化生长因子 t71(transforminggrowth{actor一81，TGF—J31)／Smad 信号转导的抗肝纤维化作用机制。 方法：本研究分体 内实验和体 外实验两部分 。在体 内实验 中，37只雄性Wistar大鼠分为正常 组(5只)、模型组 (18只)和扶正化瘀方组 (14只)。模型组和扶正化瘀组大 鼠采用二 甲基亚硝 胺 (dimethylnitrosamine，DMN)腹腔注射复制大 鼠肝纤维化模型。灌 胃治疗 4周后，采用盐 酸水解法检测肝组织 中羟脯氨酸 (hydroxypro1ine，Hyp)含量，蛋 白质 印迹法分析肝组织 中 TGF—1、TGF—1工型受体 (TGF—1typeIreceptor，T~R-I)、Smad2、Smad3及磷酸化 Smad2／3 蛋 白的表达。体外实验采用培养 4d的原代大鼠肝星状细胞 (hepaticstellatecell，HSC)，分 为对照组、TGF—t71组、1O 扶 正化瘀方药物血清组及 TJ3R一工胞 内激酶抑制剂 (SB-431542) 组。后3组用 2．5ng／mLTGF一91刺激 24h后，对 照组及 TGF一81组加 1O96／正常大鼠血清， 1O 扶正化瘀方药物血清组加 10 服用扶正化瘀方的大鼠血清，SB一431542组加 1O 正常大 鼠血清及 10~／mol／LSB一431542。共孵育24h后，免疫荧光染色检测 HSC中a平滑肌肌动蛋 白(a—smoothmuscleactin，a—SMA)和 Smad3蛋 白的表达，蛋 白质印迹法分析 HSC中 —SMA 蛋 白的表达 。 结果 ：体内实验发现，扶正化瘀方可明显降低纤维化肝组织中异常升高的Hyp含量及 TGF-~I、 一 一 — _— ————_ 圈甩隧硼骊 弹 嘲—礴髓 圈圈疆盈 懿圜强 臻豳圈 啊■_ D0I：1O．3736／jci JournalofChineseIntegrativeMedicine(JCIM)orZhong http：， ．cimjourna1corn XiYiJieHeXueBaoisaninternational，peer-reviewed， 王清兰 ，陶艳艳 ，沈丽 ，崔红燕 ，刘成海．扶正化瘀方影 响 open—accessjournalforthestudyofcomplementaryand 转化生长因子 ~l／Smad信号通路 的抗肝纤维化作用机制． alternativemedicineorintegrativemedicinefromallregions 中西医结合学报．2012；10(5)：561—568． oftheworld．JCIM isindexedinPubMedandDirectoryof WangQL，TaoYY，ShenL，CuiHY，LiuCH．Chinese OpenAccessJournals(DOAJ)．JCIM isamemberjournal herbalmedicineFuzhengHuayurecipeinhibitsliverfibrosisby ofCrossRef．Articlespublished inJCIM havemaximum mediatingthetransforminggrowthfaetor-~l／Smadssignaling exposuretotheinternationalscholarlycommunity． pathway．JChinIntegrMed．2012；10(5)：561-568． Submityourmanuscripthere： ht