幽门螺杆菌CagA蛋白和CTB融合基因的克隆及其植物表达载体的构建.pdfVIP

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第 卷第 期 20 3 VoI .20 No . 3 年 月 2 0 0 4 5 BULLETIN OF SCIENCE AND TECHNOLOGY May 2004 幽门螺杆菌CagA 蛋白与CTB 融合基因的克隆 及其植物表达载体的构建 1 1 2 3 姜云水 ,方平楚 ,付亚萍 ,朱 诚 ( 浙江大学医学院病原生物学研究所,杭州 ; 中国水稻研究所水稻生物学国家重点实验室,杭州 ; 1. 310006 2 . 310006 3 . 浙江大学生命科学学院,杭州 310029 ) 摘 要:目的 构建能在水稻胚乳中特异表达的幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白( )和霍乱毒素 亚单位( ) CagA B CTB 的植物表达载体 方法 采用高保真 技术分别从质粒 和幽门螺杆菌基因组 中扩增出 和 . PCR pGEM-CTB DNA CTB 基因,然后用 方法直接融合 基因和 基因 又用 法改造了水稻 启动子,在其 端融合加入 cagA PCR CTB cagA . PCR WX 3* 序列和 序列 通过一系列亚克隆最终将两个融合基因和 终止子插入根癌农杆菌双元载体 ! Kozak . NOS pCAMBI- A1300 的表达框架内 结果 验证和测序分析证明, 和 融合基因以正确的方向插入到载体 . PCR CTB cagA pCAMBI- 中,并位于水稻 启动子后 结论 成功构建 和 融合基因的植物表达载体,为幽门螺杆菌口服疫 A1300 WX . CTB cagA 苗的研究奠定基础. 关键词:生物工程;幽门螺杆菌; 基因; 基因;水稻 启动子;基因融合;植物表达载体 cagA CTB WX 中图分类号: 文献标识码: 文章编号: ( ) @785

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