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第 卷第 期
20 3 VoI .20 No . 3
年 月
2 0 0 4 5 BULLETIN OF SCIENCE AND TECHNOLOGY May 2004
幽门螺杆菌CagA 蛋白与CTB 融合基因的克隆
及其植物表达载体的构建
1 1 2 3
姜云水 ,方平楚 ,付亚萍 ,朱 诚
( 浙江大学医学院病原生物学研究所,杭州 ; 中国水稻研究所水稻生物学国家重点实验室,杭州 ;
1. 310006 2 . 310006
3 . 浙江大学生命科学学院,杭州 310029 )
摘 要:目的 构建能在水稻胚乳中特异表达的幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白( )和霍乱毒素 亚单位( )
CagA B CTB
的植物表达载体 方法 采用高保真 技术分别从质粒 和幽门螺杆菌基因组 中扩增出 和
. PCR pGEM-CTB DNA CTB
基因,然后用 方法直接融合 基因和 基因 又用 法改造了水稻 启动子,在其 端融合加入
cagA PCR CTB cagA . PCR WX 3*
序列和 序列 通过一系列亚克隆最终将两个融合基因和 终止子插入根癌农杆菌双元载体
! Kozak . NOS pCAMBI-
A1300 的表达框架内 结果 验证和测序分析证明, 和 融合基因以正确的方向插入到载体
. PCR CTB cagA pCAMBI-
中,并位于水稻 启动子后 结论 成功构建 和 融合基因的植物表达载体,为幽门螺杆菌口服疫
A1300 WX . CTB cagA
苗的研究奠定基础.
关键词:生物工程;幽门螺杆菌; 基因; 基因;水稻 启动子;基因融合;植物表达载体
cagA CTB WX
中图分类号: 文献标识码: 文章编号: ( )
@785
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