清肠化湿方与地榆对溃疡性结肠炎NF-κB通路与紧密连接蛋白影响与其机制.pdfVIP

响CD4+CD25+Treg细胞的发育，从而具有免疫调节作用。 较正常降低，与既往研究结果基本一致。而中西药物治疗一周后，随着小鼠一般状况的改善， 细胞Foxp3表达减少，削弱了调节性T细胞免疫抑制调节的能力。从而导致了UC的发病。中药青 发展，与西医治疗药物5-ASA疗效接近。青黛组疗效略优于靛玉红组，说明中药青黛治疗UC的 有效成分可能不仅仅局限于靛玉红，这方面的研究将继续开展。 讨UC的发病机制，也为探讨中药青黛及其有效成分在UC治疗中的作用研究提供了可靠依据，对 中医药治疗UC的新药研究打下扎实基础． 清肠化湿方及地榆对溃疡性结肠炎NF．r．B通路及 紧密连接蛋白的影响及其机制 刘智群沈洪 江苏省中医院消化科南京210029 溃疡性结肠炎(Ulcerativecolitis，UC)是一种反复发作的肠道慢性非特异性炎症性疾病，属于 factor 中医“泄泻”、“痢疾”、“肠癖”等范畴。近年来，随着对核因子．KB(Nuclearr,B,NF．媚)在肠 道炎症中的枢纽作用及黏膜屏障机制的阐明，抑制Toll样受体(Toll-like receptors，TLRs)／核因子 的表达，修复肠黏膜屏障功能已成为研究热点之一．中医学认为，UC活动期以湿热蕴结为主要病 机，我们以清热化湿、敛疮生肌为治疗原则，对刘完素治痢名方芍药汤进行化裁，拟制清肠化湿方， 用于轻中度UC的治疗，取得了良好的效果。 necrosis 本实验通过肿瘤坏死因子(Tumor 刺激HT-29人类结肠癌细胞株的体外实验，和TNBS诱导大鼠UC模型的体内实验，观察清肠化湿 及肠黏膜组织紧密连接蛋白occludin、claudin-I表达的影响，并探讨其作用机制。 l材料与方法 1．1材料 1．1．1实验动物及细胞株 细胞株：人结肠癌上皮细胞株(m．．29)：购自中国科学院细胞库． 实验室实验动物中心提供，SPF级环境饲养，许可证号：SYXK(苏)2007-0017． 1．1．2实验药物 清肠化湿方(黄连、黄芩、煨木香、炒白芍、生地榆、白芷、徐长卿、生甘草)购自江苏省医 ·445· 以上药物均在南京市药品检验所进行质量检验，鉴定为合格中药饮片。柳氮磺胺吡啶片 1．1．3实验试剂 hTNF吨(Pepm 克隆抗体(Cell SignalingTechnology公司)；兔抗TLR4多克隆抗体(Santacruz公司)：鼠抗p．acfin 抗体(北京四正柏公司)；Rhodamine(TRITC)标记的二抗(Proteintech公司)；辣根过氧化物酶 life 公司)：预先染色的蛋白分子量标准品(Marker，FermentasSciece公司)；化学发光法显色试剂 (ThermO公司)；Transwelld、室(Coming公司) 1．1．4主要仪器 Maxl90 酶标仪(美国Molecular (巩义市予华仪器有限公司)；DZF．6210真空干燥箱(上海齐欣科学仪器有限公司)；倒置显微 镜、荧光显微镜(Olympus)：电热恒温鼓风干燥箱(上海博泰实验仪器有限公司)；垂直电泳仪、 转膜仪(Bio-Rad公司)． 1．2方法 1．2．1体外实验 1．2．1．1中药清膏制备 按成人用量，称取上述清肠化湿方l付，共879，单味药物地榆459，分别投入提取罐中，浸泡， 煎煮2次，合并药液，予旋转蒸发仪中蒸发，减压浓缩，真空干燥箱中干燥成药物细粉。称取清肠 化湿方清膏26．439，即浸青量30．4％．地榆清青139，即浸青量28．9％． 1．2．1．2实验分组