一种实用碳纤电极制作方法.pdfVIP

　692 　 生理学报 , 1999 年 12 月 , 51 (6) , 692～699 Acta Physiologica Sinica 实 验 技 术 一种实用的碳纤电极制作方法3 3 3 1 2 1 蔡 　东 　瞿安连 　王晓民 　周 　专 　徐建华 　韩济生 (华中理工大学生物物理与生物化学研究所 , 武汉 430074) 摘 　要 　　碳纤电极记录可用于对单个神经及内分泌细胞分泌过程进行电化学检测 , 其中技 术关键之一是碳纤电极的制作。本文所介绍的碳纤电极的制作方法 , 简化了以往的工艺过程 , 使成功率与一致性得到了提高 , 同时检测灵敏度与噪声等指标满足了实验要求。用这样制作的 ( + ) 碳纤电极在大鼠肾上腺嗜铬细胞上研究 12甲基242苯基吡啶 MPP 对于单胺能神经细胞递质胞 吐过程的影响 , 发现 MPP+ 对于胞吐没有直接的影响并且不增加高 K+ 刺激所诱发的胞吐量。 从而提示以往所报道的将 MPP+ 通过灌流方法作用于多巴胺能神经核团 , 短时间内使组织液中 多巴胺含量上升 , 可能是由于 MPP+ 阻滞了重摄取过程所致。 关键词 : 碳纤电极 ; 分泌 ; 肾上腺嗜铬细胞; 电化学测量; MPP+ 学科分类号 : Q42 　　神经递质的释放以量子化胞吐为主要形式。以往人们是用记录突触后电位来对神经 递质分泌的生理过程和调控进行间接研究[1 ] 。近年来 , 一种新的分泌检测技术 ———碳纤 电极安培测量法开始用于细胞分泌的研究。它可以直接对胞吐出来的神经递质进行实时 检测 , 其时间、空间、化学和电学分辨率足以保证对分泌囊泡数量、单个囊泡的容量和兴 奋2分泌耦联过程研究的需要。这一方法利用的是电化学原理 , 其适宜的检测对象为肾上 ( ) ( ) ( ) ( ) ( 腺素 E 、去甲肾上腺素 NE 、多巴胺 DA 、52羟色胺 52HT 和抗坏血酸 ascordic acid , ) [2 ] ( AA 等易被氧化的神经递质 。这一实验技术的基本装备包括碳纤电极、高性能 增益带 ) 宽积和信噪比 的膜片箝放大器和有 1 kHz 记录带宽的记录仪。其中碳纤电极的制作是其 技术关键。以往的制作方法较复杂且成功率与一致性不理想[2 ,3 ] 。本文介绍一种实用的改 ( + ) 进方法 , 并使用这种电极在大鼠肾上腺嗜铬细胞上研究 12甲基242苯基吡啶 MPP 对于神 经递质分泌的影响。MPP + 是一种可以损伤单胺能神经元并引起帕金森氏病症状的神经毒 　　1998209225 收稿　　1999203218 修回 3 ( ) ( ) 　　 国家自然科学基金资助项目 No 169571014 , 、九五科技