利用体内成熟卵母细胞生产转基因克隆绵羊.pdfVIP

抗病遗传育种与繁殖技术专题《扫 289 利用体内成熟卵母细胞生产转基因克隆绵羊+ 徐静“’邓守龙“韩红兵’张运海3田秀芝。汪锋1张璐1柴盂龙1卓志勇 害俊才1冯建忠2李宁’连正兴”“刘国世”” 001 (1十目农m女学，＆京1 引言／目的 我国每年因疾病所造成的葬羊业直接损失达到7300多亿元，损失惨重。根据遗传学的基本知{』；!， 通过探索生产培养“抗病”品种提高羊的抗病性能．将成为重要突破u。而转基因技术的突破，将为培 育高抗痈力的转基囡羊提供重要的技术保障。奉研究旨在利用绵羊超数捧卵获得的体内卵母细胞进转抗 布氏轩葡基因克降羊的生产。 材料方法 时立即注射PMSG。采州手术法冲卵和移植。利用转目kTLR4基因的胎儿成纤维细胞作为供体细胞进行体细 胞核移植。显微操作使用茸吸法．将重构好的胚胎使用电融合加化学激活(离子霉素+6-DMAP)的方}击进 行融合激活。辙活后的胚胎经短暂培养后立即移植进入受体输卵管内，60d左右井对受体羊进行妊娠检查。 结果 表l供体羊冲卵情况 南触塑∞ 超㈣ 兰赢 兰点 图1体内成韩卵母细胞克隆所产羊PcR检测 讨论 本研究供体按体重确定FSH和PMSG的注射剂量，平均每只供体羊获卵1529救。体内成功重构1013 枚胚胎中，融合820枚，融合率肿95％．超过之前报道的50％～70％。从克隆羊多莉的涎生车夸，克隆 效率低严重制约着体细胞克隆技术的产业化发展，其效率仍停留在1％～10％，本次体内成熟卵重构胚 94％， 移植的63只受体羊，但经过虹娠检查5只妊娠，产仔1只．效率仍不够理想。但其妊娠率已达到7 如果对供体和受体同步性、移植重构胚数、重构胚融合激活时间间隔荨进行进一步探索．提高卵母细胞 及其重构胚质量，将进一步提高绵羊克隆胚胎移植的出生率和存活率。 参考文献(略) ：嘏黼瓣僦篇鬻瓣“一～…5’～””～“’ edu．cn．