基于大鼠应激性胃溃疡寒症模型的吴茱萸各性味组分的药性研究.docVIP

基于大鼠应激性胃溃疡寒症模型的吴茱萸各性味组分的药性研究 　　摘要： 目的：阐明吴茱萸性味组分的药性归属。方法：采用冷水应激方法造成大鼠寒症模型，以模型大鼠血清中多巴胺（DA）、五羟色胺（5-HT）、去甲肾上腺素（NE）、乙酰胆碱酯酶（AChE）及17-羟皮质类固醇（17-OHCS）等神经递质及激素含量为指标，考察吴茱萸及吴茱萸性味组分药性归属。结果：吴茱萸及各性味组分可在不同程度上纠正或缓解水应激寒症大鼠血清中与能量代谢、物质代谢相关的中枢神经递质及激素的含量。结论：判断吴茱萸及各性味组分的药性应归属为温性。 　　关键词： 寒症模型；吴茱萸；性味组分；药性 　　[收稿日期] 2013-06-20 　　[基金项目] 国家重点基础研究发展计划（973）项目（2006CB504708，2013CB531801）；黑龙江省博士后项目（LBH-Z12259）；黑龙江省教育厅科研课题；黑龙江省中医管理局课题（ZHY12-2070）；黑龙江中医药大学优秀青年教师支持计划项目（2012RCQ16） 　　[通信作者] *匡海学，教授，博士生导师，Tel：（0451E-mail：hxkuang56@163.com 　　[作者简介] 孟永海，副教授，Tel：（0451E-mail139.com 　　性与味均是中药功能的高度概括，两者既互不相同，又关系密切，可以将其看作是同一物质基础所展示出来的不同属性的功能。从中药的发展历史来看，四气药性必然存在，然而如何用科学的方法来阐释中药的四气，有关药性归属的判断标准是什么，如何量化，如何建立客观可行的中药四气的评价方法和体系？这些一直是我国中医药学者努力奋斗的目标。基于此，本文在已往吴茱萸各化学拆分组分药味归属研究基础上[1-3]，以“中药一味一性，一药X味Y性（Y≤X）”的中药性味理论新假说为中心，以中医传统性味评价结果为依据，以与能量代谢、物质代谢相关的重要神经递质和激素为指标考察吴茱萸及其各性味拆分组分的药性归属。探索药味与药性之间的关系，为揭示中药“一味一性”的客观存在提供依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 动物 清净级Wistar大白鼠，雌雄各半，体重（200±20） g，合格证号，饲养于本校实验动物中心SPF级屏障动物实验室。室内温度20～25 ℃，相对湿度40%～70%，12 h循环照明。动物日常护理及实验条件均符合《中华人民共和国卫生部实验动物环境及设施标准》。 　　1.2 药物与试剂 实验用吴茱萸各性味拆分组分由课题组自制[4]，其中辛味组分为“生物碱1组分和20%乙醇洗脱组分”，苦味组分为“生物碱2组分、醇沉组分、95%乙醇洗脱组分以及吴茱萸内酯”[1]。大鼠多巴胺（DA）酶联免疫检测试剂盒、大鼠五羟色胺（5-HT）酶联免疫检测试剂盒、大鼠去甲肾上腺素（NE）酶联免疫检测试剂盒、大鼠乙酰胆碱酯酶（AChE）酶联免疫检测试剂盒、大鼠17-羟皮质类固醇（17-OHCS）检测试剂盒均为美国RD公司产品。 　　1.3 仪器 Anthos 2010型酶标仪（奥地利Anthos Labtec公司）；Eppendorff移液器（Eppendorff公司）；涡旋混匀器（美堰市康健医疗器具有限公司）；低温离心机（日本日立公司）。 　　1.4 分组 取Wistar大白鼠60只，随机分为6组，每组10只。分别设为空白组、模型组、吴茱萸水煎液组、吴茱萸辛味组分组、吴茱萸苦味组分组、挥发油组分组。 　　1.5 动物模型制备[5] 吴茱萸水煎液及各拆分组分按人和大鼠体表面积等效剂量折算（0.018）配成质量浓度为生药0.067 5 g?mL-1的溶液备用，灌胃量为20 mL?kg-1，相当于生药1.35 g?kg-1。各组实验动物连续给药7 d（空白组和模型组给予同体积的蒸馏水），造模前，将大鼠禁食48 h，自由饮水，末次给药30 min后，用乙醚轻麻大鼠，将动物仰卧固定于大鼠固定板上，将其下半身置于（20.0±1.0） ℃的冷水，水面齐剑突水平，7 h后将大鼠于冷水中取出并吹干（空白组不造模直接取血）。用乙醚轻麻大鼠经颈总动脉取血，血样静置1 h后高速离心分取血清；打开腹腔，剪下胃，浸泡于1.0%甲醛中20 min，沿胃大弯剪开并展平，用小棉球轻轻将黏膜上的黏液和血块擦掉，观察黏膜损伤程度，游标卡尺测定溃疡指数。 　　1.6 溃疡指数（UI）测定 按Guth标准[5]计算溃疡指数（UI）：点状出血为1分，线状出血长度 4 mm为5分，宽度 1 mm时分值×2。 　　1.7 血清中多巴胺（DA）、五羟色胺（5-HT）、去甲肾上腺素（NE）、乙酰胆碱酯酶（AChE）及17-羟皮