内毒素对妊娠期糖尿病患者外周血单核细胞TLR4 mRNA及NFκ-B mRNA表达的影响.pdfVIP

· 254 · 安徽 医科大学学报 ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2011Mar；46(3) ◇临床医学研究◇ 内毒素对妊娠期糖尿病患者外周血单核细胞 TLR4mRNA及 NF．KBmRNA表达的影响 李从青 ，姚 洁 ，刘长明 ，丛 林 摘要 目的 研究妊娠期糖尿病 (GDM)患者外周血单核细 者外周血单核细胞(monocytes，MNS)在LPS作用下 胞在内毒素 (LPS)作用下Toll样受体4(TLR4)mRNA及核 TLR4mRNA及NF—KBmRNA的表达 ，探讨 GDM可 因子一KB(NF—KB)mRNA的表达，探讨GDM的发病机制。方 能的发病机制。 法 正常妊娠孕妇20例为对照组，GDM患者20例为GDM 组，受试者静脉血分离出单核细胞 ，用 LPS刺激并培养 ，RT— 1 材料与方法 PCR法检测单核细胞TIR4mRNA及 NF—KBmRNA的表达， 1．1 实验分组 GDM组20例，纳入标准参照我国 ELISA法检测培养液中白介素一1(IL一1)、IL一10、肿瘤坏死 因 妊娠合并糖尿病 临床诊 断与治疗推荐指南 J。 子一 (TNF一)水平。结果 与对照组相 比，GDM组 TLR4 mRNA及NF—KBmRNA表达增加，差异具有统计学意义 (P GDM组患者年龄 22～38(31．35±6．56)岁，孕周为 0．01)。两组TLR4mRNA与NF—KBmRNA表达水平存在 28～32(29．574-1．56)周。同时取20例正常孕妇 相关性 (r。=0．768，甜f!{{=0．833，P0．05)。与对照组比 设为对照组，对照组年龄23～37(29．05-44．54)岁， 较，GDM组 IL一1、IL一10及TNF一仅水平升高，差异具有统计学 孕周为29～34(32．29-42．21)周。存在胎膜早破 、 意义(P0．05)。结论 GDM组孕妇体内TLR4mRNA、NF— 先兆早产以及合并其它潜在 的炎症者均不纳入本次 KBmRNA呈高表达，炎症因子 IL一1、IL一10、TNF—ol升高，提示 研究范围。所有受试者均签署知情 同意书，方案经 存在免疫炎症，LPS—TLR4一NF—KB通路介导了大量炎症 因子 医院伦理委员会讨论通过。 释放，参与了GDM的发病。 1．2 主要试剂 人淋 巴细胞分离液 (上海华精生 主题词 糖尿病，妊娠；内毒素类 ；Toll样受体4；NF—KB 物高科技有限公司)，LPS、台盼蓝 (Sigma公司)， 中图分类号 R587．1；R392．11 RPMI1640培养基 (赛默飞世尔生物化学制品有限 文献标识码 A 文章编号 1000—1492(2011)03—0254—04 公司)，TRIzol(Invitrogen公司)，RT试剂盒、PCR试 剂盒及 PCRMarker(Fermentas公司)，PCR引物 由 妊娠期糖尿病 (gestationaldiabetesmellitus， 上海生工生物工程技术服务有限公司合成，ELISA GDM)是妊娠期首次发生或发现的糖代谢异常，为 试剂盒(深圳晶美生物工程有限公司)，其他试剂均 妊娠期常见的合并症之一。GDM 由多种因素作用 为国产分析纯。 引起 ，胰岛素抵抗 (IR)和胰岛B细胞分泌降低是 1．3 样本采集及细胞培养 对 GDM