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维生素C对硼替佐米诱导多发性骨髓瘤细胞株KM-3凋亡作用的影响 来源:医学论文发表——创新医学网/   作者:朱云鸿, 徐瑞容 黄红铭, 丁润生, 陆 伟 作者单位:南通大学附属医院血液科, 南通 226001   【摘要】 目的:为了研究维生素C对硼替佐米诱导多发性骨髓瘤细胞株KM-3细胞凋亡效应的影响。方法:采用细胞计数法检测硼替佐米15 nmol/L+10、20、40、80 μmol/L维生素C处理KM-3细胞生长抑制率,用流式细胞术分析Annexin-V/PI、线粒体跨膜电位(Δψm)和氧自由基(ROS),用分光光度法检测Caspase3活性。结果:硼替佐米对KM-3细胞增殖抑制作用降低,24 hAnnexin-V阳性细胞比例下降,△ψm降低被阻止,18 h活性氧水平下降,16 h Caspase-3活性下降。结论:维生素C对硼替佐米诱导KM-3细胞凋亡效应具有抑制作用。   【关键词】 多发性骨髓瘤;维生素C;硼替佐米;凋亡;活性氧   Effect of Vitamin C on Bortezomib-induced apoptotic death in multiple myeloma cell line KM-3   ZHU Yunhong,XU Ruirong,HUANG Hongming,et al (Department of Hematology, the Affiliated Hospital of Nantong University,Nantong 226001)   [Abstract] Objective: To investigate the effect of Vitamin C on multiple myeloma cell line KM-3 apoptosis induced by Bortezomib. Methods: Cell viability inhibition ratio was estimated by counting method. Annexin-V,mitochondrial transmembrane potential(Δψm) and reactive oxygen species(ROS) labeled by DCFHDA were examined by flow cytometry, and the activity of Caspase-3 was detected by spectrophotometry. Results: The inhibition of Bortezomib on the multiple myeloma cell line KM-3 proliferation was decreased, the ratio of Annexin-V positive cells at the 24th hour declined, the decrease of △ψm was prevented, the level of ROS at the 18th hour dropped, and the activity of Caspase-3 at the 16th hour declined. Conclusion: Vitamin C may abrogate the ability of Bortezomib to induce apoptosis on multiple myeloma cell line KM-3.   [Key words] Multiple myeloma;Vitamin C;Bortezomib;Apoptosis;Reactive oxygen   蛋白酶体抑制剂是近年来发现的一种靶向治疗肿瘤的药物。在真核细胞中80%以上蛋白降解是通过蛋白酶体介导的,蛋白酶体抑制剂通过对蛋白酶体的抑制剂发挥抗肿瘤作用[1]。硼替佐米是一种高选择性,可逆的26S蛋白酶体抑制剂,是第1个进入临床的该类药物。目前认为硼替佐米的主要作用机制是抑制I-κB在蛋白酶体内降解,使NF-κB停留在细胞质内,功能受抑制,失去抗凋亡效应和刺激细胞增生作用[1-2]。维生素C是一种多羟基化合物有清除氧自由基,抗氧化作用[3]。研究显示维生素C能增强三氧化二砷对高发性骨髓瘤(MM)疗效[4]。本实验探讨抗氧化剂维生素C对硼替佐米诱导多发性骨髓瘤KM-3细胞株凋亡的影响。   1 材料和方法   1.1 细胞培养 多发性骨髓瘤细胞株KM-3(由上海长征医院血液科侯健教授惠赠)置于含10%的胎牛血清(杭州四季青生物工程有限公司产品)的RPMI1640培养液(Gibco公司产品)中,于37 ℃、5%CO2和95%空气湿度条件下进行培养。实

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