养精胶囊对大鼠生精功能的影响研究.pdfVIP

研究认为，自由基损伤和免疫功能低下是衰老的重要机制之一，本实验通过观察养精 胶囊对老年大鼠睾丸生精细胞的微观影响、自由基的清除作用、以及对精子部分参数的影 响以探析其改善生精功能的可能作用机制。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 动物 SD 大鼠（清洁级），体重450~500g，雄性。由浙江省医学科学院提供，许可 证号SCXK （浙）2008-0033 。实验室温度 （23±2 ）°C ，相对湿度40%~60%，常规饲料喂 养，自由饮水。 1.1.2 试验药物 养精胶囊，0.5g/粒，由南京军区南京总医院制剂科生产提供[院临（2004 ） 第01002 号]；十一酸睾酮胶丸，40mg/粒，法国 Catalent France Beinheim S.A.生产，批号： 058134 。以上药物在临用时以蒸馏水配成相应浓度的溶液备用。 1.1.3 试剂及仪器 电子秤，天津市天平仪器有限公司；FA2104 型电子分析天平，上海精 科仪器厂；WLJY-9000 型伟力彩色精子质量检测系统；DKB-8A 型电热恒温水槽，上海 精宏实验设备有限公司；SOD 试剂盒，MDA 试剂盒，南京建成科技有限公司，批号分别 为。 1.2 方法 1.2.1 分组与给药 老年雄性SD 大鼠，体重470 ±20g，适应性喂养后，随机分为5 组， 每组 10 只，分别是空白对照组、阳性药对照组、养精胶囊高/ 中/低剂量组；灌胃给药， 高/ 中/低分别按照成人用量的 12/6/3 倍给药，阳性药参照养精胶囊中剂量组给药，每日 1 次，连续30 日。 1.2.2 指标检测方法 ①空腹眼眶取血 4ml，分离血清，严格按照试剂盒测定步骤检测大 鼠SOD、MDA 指数。②颈椎脱臼法处死大鼠，取双侧睾丸、附睾，剥离脂肪组织，用冷 生理盐水冲洗， 除去血液，滤纸滤干， 电子天平称重。计算平均组织重量，并计算脏 6 器指数。脏器指数(g/g) = 脏器重量(g) /大鼠体重(g) ×10 。③精子悬液制备：双侧附睾置 于4m l 生理盐水(37°C 预温)中，用眼科小剪子剪碎，吸管吹打；精子参数测定：用CASA 系统观察精子密度、活率、活动力等指标。④睾丸形态学观察:取每只大鼠左侧睾丸组织， 用甲醛固定液固定后石蜡包埋，切片，HE 染色，光镜下观察生精小管形态和精子发生状 态，包括曲细精管、精子、生殖细胞层次分析。 1.2.3 统计学方法 组间比较采用Excel 软件行双侧t 检验，结果以x±s 表示，P0.05 为 差异具有显著性，P0.01 为差异具有极显著性。 2 结果 2.1 对SOD/MDA 的影响 养精胶囊给药组可以明显的提高大鼠血清SOD 指数，降低MDA 指数，与空白对照组比较，具有统计学差异（P0.05 ，P0.01 ），这一结果表明给药后大 鼠机体抗氧化衰老能力增强，清除脂质过氧化物的能力增强，结果见表1。 2.2 对脏器系数的影响 养精胶囊给药组可以明显的提高睾丸、附睾的脏器系数，与空白 对照组比较具有统计学差异（P0.05 ，P0.01 ），这一结果表明，养精胶囊可以有效的延 缓衰老所致的脏器系数进行性降低，这对维持生精功能意义重大，结果见表2 。 2.3 对精子参数的影响 养精胶囊给药组可以明显的提高大鼠精子的密度和活力，高、中 剂量组尤为显著，经统计分析，有显著差异 （P0.05 ，P0.01 ），结果见表3 。 2.4 睾丸组织学观察 空白对照组组织结构清楚，曲细精管内各级生精细胞排列规则，基 底至腔面可见精原细胞，各级精母细胞，精子细胞等各个发育阶段细胞，可见较多分裂期 细胞，管腔内可见成熟精子，间质稀少，血管丰富，间质细胞发育良好。养精胶囊给药组 组织结构清楚，曲细精管内各级生精细胞排列规则，基底至腔面可见精原细胞，各级精母 细胞，精子细胞等各个发育阶段细胞，对比空白对照组细胞增殖较活跃，可见较多分裂期 细胞，管腔内成熟精子数目较多，间质稀少，血管丰富，间质细胞发育良好，以高剂量组 改变较显著。见图1。 表 1.养精胶囊对大鼠血清SOD、MDA 指数的影响 （ ±s,n=10） x Table 1. The impat of Yang Jing Capsul on the serum