细胞大规模培养技术在生物制药中的应用.pdfVIP

科投毒跑 细胞大规模培养技术在生物制药中的应用 吴旭国 哈尔滨三木制药厂 黑龙江五常 150232 【摘 要】动物细胞培养基是体外细胞培养的重要因素，能够影响 细胞 ，在一定条件下的体外培养后，可以获得无限增殖的潜力，用它 细胞生长。它是利用动物细胞体外培养和扩增来生产生物产品，或者作为 们来生产疫苗可以大大降低实验动物的用量。更为重要的是，用动物 发现和测试新的工具。为此本文就动物细胞培养基的发展及应用进行了 细胞体外大规模培养技术生产的疫苗可以保证质量，因为所用的细 简要的介绍。 胞性质均一，经过严格的安全检验，克服了动物个体间的差异造成的 I关键词】生物制药；动物细胞培养；应用 疫苗质量不稳定的问题，并且大大降低了来自动物的病原体传染使用 者的可能性 。用类似的细胞培养技术可生产酶、细胞因子、抗体等生 一 ， 动物细胞的特点及生长特性 物制品，其先决条件是能够获得可分泌目标蛋白的细胞系。但是，在 动物细胞虽可像微生物细胞一样，在人工控制条件的生物反应 基因工程技术出现之前，细胞表达蛋白的水平很低，因而用这种工艺 器中进行大规模培养，但其细胞结构和培养特性与微生物细胞相比， 生产蛋白制品产量低、成本高，因此早期的动物细胞技术只用于疫苗 有显著差别：①动物细胞比微生物细胞大得多，无细胞壁，机械强度 及少量的干扰素和尿激酶的生产。基因重组技术和杂交瘤技术大大 低，对剪切力敏感，适应环境能力差；②倍增时间长，生长缓慢，易受 促进了动物细胞技术的进步及其在工业领域的应用，使动物细胞大 微生物污染，培养时须用抗生素 ；③培养过程需氧量少；④培养过程 规模培养技术在生产疫苗中越来越重要。 中细胞相互粘连以集群形式存在{⑤原代培养细胞一般繁殖50代即 传统上一直把细胞培养产物用于人类和牲畜的病毒疫苗，这些 退化死亡；⑥代谢产物具有生物活性，生产成本高，但附加值也高。 疫苗至今己被大规模应用。口蹄疫疫苗是大规模动物细胞培养方法 二 动物细胞大规模培养技术的发展 生产的主要产品之一 。1983年，英国Wetlcome公司就已能够利用动 动物细胞大规模培养技术生产大分子的生物制品起始于20世纪 物细胞进行大规模培养生产 口蹄疫疫苗。美国Genentech公司应用 6O年代，当时是为了满足生产疫苗的需要。后来随着大规模培养技术 SV40为载体，将乙型肝炎病毒表面抗原基因插入哺乳动物细胞内进 的逐渐成熟和转基因技术的发展与应用，人们发现利用动物细胞大 行高效表达，已生产出乙型肝炎疫苗。 规模培养技术来生产大分子药用蛋白质比原核细胞表达系统更有优 2．单克隆抗体 越性。因为重组DNA技术修饰过的动物细胞能够正常地加工、折叠、 单克隆抗体在体外诊断、体内造影、人和家畜的治疗以及工业上 糖基化、转运、组装和分泌 由插入的外源基因所编码的蛋白质，而细 的应用日益广泛 ，需要量可达数百克。有些系统的单克隆抗体的需要 菌系统的表达产物则常以没有活性的包含体形式存在。随着大量永 量在今后几年内将迅速增加到几公斤的数量级。为此，迫切需要更有 生性细胞株的创建，在商业利益的刺激下，动物细胞大规模培养技术 效的生产方法。采用传统方法(小鼠或大鼠的腹水瘤培养法)生产单克 也迅速发展起来，并被应用到生产实际。 隆抗体，已不能适应实际需要。应用大规模细胞培养系统生产各种不 动物细胞培养主要用于生产激素、疫苗 单克隆抗体、酶、多肽 同的单克隆抗体是经济可靠的方法。如英国Celltech公司采用10100 等功能性蛋白质，以及皮肤、血管、心脏、大脑、肝、肾、肠等组织器 ~DIO001自动气升式培养系统，培养各种生产单克隆抗体的小鼠、大 官。它在医药工业和医学工程的发展中占重要地位。大规模动物细胞 鼠和人的细胞株 ，生产各种单克隆抗体的产品。到目前为止，已成功 培养生产药物产品将是