甘肃棘豆对SD大鼠组织损伤的病理学研究.pdfVIP

中国畜牧兽医学会家畜内科学分会 中国·南昌 第七届代表大会暨学术研讨会论文集 动物疯草中毒的病理变化与溶酶体代谢障碍引起的低聚糖蓄积病相似，当机体的糖蛋白 合成异常时，低聚糖蓄积于洛酶体内，引起细胞空泡变性，造成组织器官损害和功能障碍， 基于这一特征Colegate等于1979年从灰苦马豆中首次分离到了SW纯品。动物疯草中毒病 典型临床表现为运动障碍，后肢无法站立，病理学主要以组织的空泡变性为特征，肝脏、肾 脏、脾脏、心脏、大脑、小脑等组织器官均能发生病变。本试验以甘肃棘豆为毒源，复制甘 肃棘豆亚急性毒性试验模型，观察中毒大鼠病理组织学变化，以探讨SW对SD大鼠组织损 伤并评价其亚急性毒性作用。 l材料及方法 1．1材料 1．1．1植物样品 E)，风干粉碎后置阴凉处保存。植物标本由西北农林科技大学生命科学学院植物研究所鉴 定。 1．1．2试验动物 7周龄清洁级雄性SD大鼠16只，体重208．1士13．6 g，购于西安交通大学医学院实验动 物中心。 1．1．3动物饲粮 将甘肃棘豆全草充分研磨，过200目筛，按15％、30％、45％(相当于SW含量为0．03％0、 0．06％0、0．09％0)【11的比例与全价饲料混合(面粉25％，玉米粉28％，豆饼20％，麸皮10％， 鱼粉10％，植物油l％，酵母粉1％，骨粉2％，食盐l％，鱼肝油l％，矿物质添加剂0．90／o， 维生素添加剂O．1％)[21，加水搅拌制成1-3cm3块状混合日粮，干燥后备用。 1．1A主要试剂及仪器 梯度酒精、二甲苯、石蜡、改良苏木素．伊红染液；石蜡切片机(德国LEICA公司)、 MotieBA210数码照相系统(Motic)、生物显微镜(重庆重光)。 1．2方法 1．2．1大鼠甘肃棘豆亚急性中毒模型的建立 I)、 将16只SD大鼠随机分为4组，每组4只，分别为对照组(ConG)、试验I组(ExpG G GⅢ)，分笼饲养，自由采食和饮水。对照组饲喂 试验Ⅱ组(ExpII)和试验Ⅲ组(Exp 全价饲料，试验I组、Ⅱ组、Ⅲ组分别饲喂含15％、30％、45％甘肃棘豆的混合日粮。每天 观察并记录试验各组大鼠的饮食状况、精神状态、行为活动及临床症状等变化，至疯草中毒 典型症状出现模型复制结束。 1．2．2体重测定 每周定期称量各试验组大鼠体重，并观察记录各试验组大鼠的精神状态、饮食状况、运 动行为、被毛及体格发育等临床表现，至攻毒结束。 中国畜牧兽医学会家畜内科学分会 中国·南昌 第七届代表大会暨学术研讨会论文集 1．2．3大鼠处死、取材及病料处理 待试验动物发生疯草中毒典型临床症状后全部心脏灌注多聚甲醛致死，采集脑、肝脏和 肾脏，4％多聚甲醛固定，常规石蜡包埋、切片、HE染色。光镜下观察组织病理学变化，并 拍照。 2结果 2．1SD大鼠临床症状及体重变化 2．1．1临床症状 对照组未见明显异常。攻毒的第1周各试验组SD大鼠被毛失去光泽，尾尖变凉。第3周 各试验组SD大鼠被毛竖立，其中Ⅲ组表现最为明显。随着攻毒时间的延长，上述临床症状 持续存在，到攻毒第77天试验Ⅲ组SD大鼠出现明显中毒症状，表现为间歇性躁动不安、头 部及四肢呈神经性震颤，对外界刺激反应迟钝、运动协调性下降。 2．1．2体重变化 由图l可以看出，各试验组大鼠平均体重增长趋势低于对照组，与对照组相比，试验组 Ⅲ组差异极其明显，试验I、n组差异不明显。其中试验Ⅲ组在6周前未见增长，之后呈下 降趋势。 550 500 十对照组 斗试验I组 450 尊@400 ．6．试验Ⅱ组_卜试验m组