DNA指纹技术在安哥拉山羊改良本地山羊中的遗传分析.pdfVIP

试验研究 1999--2000年全国养羊生产与学术研讨会议论文集175 DNA指纹技术在安哥拉山羊改良 本地山羊中的遗传分析。 王杰1。沈富军1，欧阳熙1，王永1，革志红2 (1．西南民族学院，四川成都610041；2．凉山州畜科所) 摘要：以(CA／GATA／／[CC)，探计．Hi．fi酶切，研究安哥拉山羊和建昌黑山羊及安哥拉山羊与建 昌黑山羊级进杂交的F2、F3的DNA指纹图谱。结果，在供试山羊中，个体平均检出18．2±0．4条 谱带，安哥拉山羊、F2、F3的鉴别机率分别为1，38X10叫2，1．18×10‘13，0．50×10。10；群体内相似 I 系数安哥拉山羊为0．4539，F2为0．4077，R为0．61l；亲子鉴定的父权概率w=0．9889；安哥拉 山羊与建昌黑山羊比较．2．3kb和8．6kb谱带为安哥拉山羊的特异谱带。 关键词：DNA指纹；山羊改良；遗传分析 DNA指纹技术是一种较为理想的分子遗传标 基因组DNA的提取，参照蔡良琬(1987)的方法进 记检测技术。但目前国内尚无DNA指纹技术在马 行。基因组DNA的限制酶切和琼脂糖化电泳，参考 海毛山羊育种中应用的研究报道。四川在干旱和干 萨姆布鲁克等介绍的方法试验。Southern印迹、 热河谷地区．应用安哥拉山羊改良本地山羊，拟育成 (CA／GATA／TCC)，探针标记、分子杂交等，借鉴申 马海毛山羊新品种，目前已级进杂交到三代，数量已 滨等(1995)的方法进行。 达1万余只，现正在开展横交试验。为了加快遗传 1．3 DNA指纹图谱分析 进展，我们应用DNA指纹(DNA fingerpriming， 根据Jeffreys(1986)研究，在亲本DNA指纹图 DFP)技术，对安哥拉山羊改良本地建昌黑山羊进行谱中，绝大多数谱带源于杂合座位，往往只有1个等 了遗传分析研究。 位基因呈现在DNA指纹图谱上。通常将每I条谱 1材料与方法 带看作相应基因座上的1个等位基因，进行统计分 1．1材料 析，计算公式： I．1．1群体遗传分析样本随机选择健康的安哥 鉴别机率(pu)=(1+2x+2f)n／x 拉山羊14只，建昌黑山羊6只，安哥拉山羊×建昌 谱带共有率(x)=(N^B／N,+hk，№)，2 黑山羊F26只、B5只．比较群体问DNA指纹的差 平均等位基因频率(g)=l—I—x 异。 相似系数(f)=2N^B／(N^+№) 1．1．2亲子鉴定样本安哥拉山羊亲子鉴定样本． 式中．IR为个体平均谱带数；N-与NB分别为个 选择系谱清楚的安哥拉出羊A一0和己知母亲A一 体A和B的谱带数，卜k为个体A和B的共有谱带 014、父亲A一2和其他安哥拉山羊公羊，共5只．检 数。 验应用DNA指纹技术进行亲子鉴定的准确性；杂 2结果与分析 种羊亲子鉴定样本选择拟作攒交试验的优秀杂种公 羊F2—1．已知其母亲为F．一52，尚有4个嫌疑父 构造供试山羊DNA指纹图谱 亲，即安哥拉山羊A一1l、A一13、A一3l和A一83， 亟待鉴定出E—l公羊的真实父亲。 应用(CA／GATA／FCC)，探针，Hinfl酶切构造 I，2方法 DNA指纹图谱，见图1、图2。 从供试羊颈静脉采集全血，于4℃下保存备用。 2．1．1 DNA指纹谱带的空间分布以(CA／GA—