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TRPV5与特发性高钙尿症的研究进展 作者：胡东亮 作者单位：华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科，湖北武汉 430030 【关键词】 TRPV5 特发性高钙尿症 尿钙 　特发性高钙尿症(Idiopathic Hypercalciuria, IH)为一种常见的多因素、多系统参与的受遗传、环境、饮食影响的钙代谢紊乱，是指排除各种已知疾病，24h尿钙排泄量0.1mmol/kg或者男性≥7.5mmol、女性≥6.25mmol。它是泌尿系结石形成的最危险因素。尿石的形成是由多因素引起的[1]，目前的泌尿系结石约有80%以上为含钙结石，而对于钙性结石，其中40%-50%是由高钙尿引起的。IH的发病率与死亡率逐年升高，成为威胁人类健康的重要疾病之一。在美国，每1000例住院患者中就有7-10例是泌尿系结石患者。但IH具体发病机制还不甚清楚，国内外主要集中在胃肠道钙吸收、1，25(OH)2D3和其受体VDR的研究上，临床上也没有有效的治疗方法。近年来，对IH的研究已逐步拓展到肾脏、骨骼等其他可能参与发病的部位，而TRPV5作为肾脏远曲小管尿钙重吸收的上皮通道，决定着Ca2+ 的最终排泄，同时又受其他多种因素的影响与调节，正逐步成为研究IH的发病机制和临床治疗的热点。 　　1 TRPV家族的简述 　　1969年，Cosens和Manning在验证果蝇视觉信号传导的研究中首先发现并命名了瞬时感受器电位(transient receptor potential, TRP)蛋白。1989年，Montell等首次成功克隆了TRP基因。随后的研究证明TRP基因具有编码钙通透性阳离子通道的功能[2]。目前为止，TRP已被划分为TRPC、TRPV、TRPM、TRPP、TRPML、TRPN共6个亚家族[3]，分别具有不同的分布、不同的激活途径以及不同的功能，其中TRPV是第一个被命名的哺乳动物类亚家族，共有6个成员：TRPV1-TRPV6，其中与钙代谢及调控有关的是TRPV5和TRPV6[45]。本文主要讨论TRPV5。 　　2 TRPV5的分子生物学特征 　　TRPV5(以前也称为ECaC1)最早从兔集合小管上皮细胞原代培养中克隆获得[4]。在人类，TRPV5定位于染色体7q35，由15个外显子组成，共2772个bp，其中有2187个bp为开放读码框，编码729个氨基酸组成的多肽，分子质量约为83ku[6]。在TRPV5的5端上游启动子区域没有发现经典的TATA盒和CAAT盒，但发现4个可能参与调控的1，25(OH)2D3反应元件。在1，25(OH)2D3存在的情况下，这些反应元件很可能是1，25(OH)2D3调控TRPV5的转录结合点，通过结合及一系列的调控、转导进而刺激TRPV5的mRNA表达，促进其生物学活性的表达。另外，在启动子区域还发现一些转录激活因子结合部位，如激活蛋白1(AP1)、激活蛋白2(AP2)、刺激蛋白1(SP1)。 　　TRPV5的蛋白结构由6次跨膜所组成，N、C端均位于胞浆内，其中在跨膜区5与跨膜区6之间有一段短小的疏水区，在N、C端有丰富的调控元件，包括6个磷酸化的蛋白激酶C序列、3个锚蛋白重复序列和1个PDZ区域。PDZ是个非常重要的蛋白mdash;蛋白结合作用区域，它可能在调控TRPV5的蛋白运输上起着关键作用[7]。随着对TRPV5研究的不断深入，发现越来越多在TRPV5的核苷酸水平、氨基酸水平上的调控靶点及作用靶点：Dimitra等[8]发现80KH作为第一个参与TRPV5对钙调控的蛋白，其作用靶点是定位于TRPV5的C端598到608之间的氨基酸序列上；Jean等[9]证实TRPV5的D542天冬氨酸残基是决定TRPV5亲钙性的关键部位；Suzuki等[10]研究发现TRPV5的第579个氨基酸变异可以直接影响胞内Ca2+对其的灭活性。由此看来，TRPV5的分子生物学特征直接决定着它的功能。对TRPV5结构、氨基酸序列、基因等方面的深入研究有望发现更多的未知功能与调控机制。 　　3 TRPV5的组织分布与生理功能 　　3.1 TRPV5的分布 TRPV5的分布具有种属特异性和组织特异性，各家报道很难完全统一。在人类，TRPV5主要表达在一些对1，25(OH)2D3敏感的上皮细胞与组织。Hoenderop等[11]应用免疫组化的方法证实了在肾脏远曲小管(DCT)、集合小管(CNT)以及十二指肠中有TRPV5的表达，同样应用免疫组化，Janssen等[12]证实了TRPV5在胰腺Β细胞中有表达。另外，国外学者还应用Northern杂交与RTPCR方法证实了在前