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解毒酶基因cDNA克隆和高效表达.pdf
生 物 工 程 学 报 卷
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组，实验一组同时给予 （装入空胶囊中，剂量为
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／ ，口服）和表达解毒酶的大肠杆菌（ 湿菌体装
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( ( (
入空胶囊中，口服）；实验二组，先给予 （装入空胶囊
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中，剂量为 ／ ，口服）， 后给予表达解毒酶的大
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肠杆菌（ 湿菌体装入空胶囊中，口服）；对照一组只给予
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（装入空胶囊中，剂量为 ／ ，口服）；对照二组同
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时给予 （装入空胶囊中，剂量为 ／ ，口服）和转
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空质粒的大肠杆菌（ 湿菌体装入空胶囊中，口服）。给
*+
(
药后密切观察被试鸡的急性中毒情况，在给药后 称重，
$/
处死被试鸡。
! 结 果
库蚊解毒酶基因 的克隆和原核表达质粒的构建
!0 1
产物电泳显示约在 处出现特异扩增条
234#52 $*6)7
带（图 ）。 产物经末端加 后，与克隆载体
$ 234#52 8 :5’4
9
连接，转化大肠杆菌 ，蓝白筛选得到阳性克隆。
3 !;+! 1$4
!=8长为 ，编码 个氨基酸，分子量 ，测
$6?7 +, 6*%)!
9
序结果表明， 序列与文献报道的序列完全相同。
1$4!=8
图$ 234#52产物的电泳图
图 重组表达质粒 的构建
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9
@-0$ ABCDEFGFECH-HFI234#52 EF/JDH
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$0#EF/JDHK’ B-I-C/7 #52
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大量制备经测序鉴定的 ，经 酶切，
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