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特异性siRNA抑制Bclxl基因在T24细胞中表达的研究.pdf
7 a1.Marrowstromalcells∞asou- marrow differentiateintoneurons
PereriaRF,O’Ham AV,et stromalcells Neurosci
MD,Laptev J].J Res,2000;
mof cellsfor tissuesin witlla
progenitornonematopoietictransgenicphe- 61(4):364-71.
of NatlAcadSci 10Weiss a/.Isthereaneuralstemcellin
notypeestegeogenesisimperfecta[J].ProUSA,1998;95 S,ReynoldsBA,VescoviAL,et
(3):1142-9. mammalia
8 Nilsson a1.Cells ofbone
HU,et
SK,DoonerMS,Weier capable production
formwholebonemarrow innonablated
engraft transplants mice[J].JExp (编辑张慧)
Med,1999;189(4):729-36.
9 a1.Adultratandhumanbone
WoodburyD,SehwarzEJ,ProckopDJ,et
特异性siRNA抑制Bcl.xl基因在T24细胞中表达的研究
林相国 孔垂泽柳东辉 姜华茂 刘贤奎 (中国医科大学附属第一医院泌尿外科,辽宁 沈阳 110001)
(摘要]目的研究RNAi(RNA
以抑制Bcl-xl基因的表达,为利用RNAi抑制Bcl-xl的研究奠定基础。
[关键词】T24细胞;RNA干扰;siRNA;Bcl—xl
【中图分类号]R737.14[文献标识码]A 【文章编号]1005-9202(2006)04-0522-03
RNAi技术用于人类疾病治疗倍受关注,已经成为功能基 以扩增的引物。即Bcl-xl
因组研究的有力工具,并且有可能在某些疾病如肿瘤等的基因
治疗中发挥重要作用。有研究表明,siRNA具有抑制作用强、
稳定性高、细胞摄取相对容易等优点,正逐渐取代反义核昔酸, bp。
成为新的研究热点…。本试验就是通过化学合成siRNA,转染1.2.3
入膀胱癌T24细胞株,探讨Bcl—xl基因在膀胱癌发生发展过程
活胎牛血清、青霉素(100
中的作用,为今后关于RNAi技术在膀胱癌动物模型及基因治
McCoy’5A培养基。
疗中的应用奠定科学基础。
1资料与方法
1.1 材料人膀胱癌细胞株T24细胞购于购自中科院上海细
48
胞库。试剂:LipofectaminTM2000购自Invitrogen公司,Reverse
5A培养基2ml培养3~4h。按转染试剂盒说明书转染。未
transcriptionsystem购自Promega公司,Trizol试剂购自Invitro-
转染组不加入siRNA,其他与转染组处理相同。
gen公司,TaqDNA聚合酶购自TAKARA公司,dNTP购自上海
1.2.5半定量RT-PCR转染后72h,收集培养的3组细胞,按
生工公司。非特异siRNAs(0.15g
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