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梅花鹿角柄骨膜蛋白质组学初步研究.pdf
特 产 研 究 SpecialWildEconomicAnimalPlantResearch
文章编号 :1001—4721(2011)O10001—04
梅花鹿角柄骨膜蛋 白质组学初步研究
徐代勋 ,王桂武 ,赵海平 ,杨颖 ,宁浩然 ,李春义
(1舡 苏科技大学 ,江苏 镇江 212018;2.中国农业科学院特产研究所,吉林 吉林 132109)
摘要:为了利用蛋白质组学技术探索鹿茸研究模型中的特异性蛋白,本试验探索了一套完整的梅花鹿角柄骨膜蛋白提取及纯
化方法。角柄是雄鹿头上着生的永久性骨桩,鹿茸每年由该骨桩上脱落和再生。本试验采集了梅花鹿角柄骨膜 ,利用冷冻液
氮研磨法提取蛋白样品。蛋白样品分别经过丙酮沉淀和TCA一丙酮沉淀处理。结果显示,TCA一丙酮沉淀处理后电泳图谱斑点清
晰,分辨率较高 ,是双向电泳蛋白提取样品的较优处理方法。
关键词:梅花鹿;角柄骨膜 ;双向电泳;TCA一丙酮沉淀
中图分类号:Q816 文献标识码 :A
Proteom icsStudyOnPediclePeriosteum ofSikaDeer
XU Dai—xunl,2,WANG Gui—wuz.ZHAOHai—ping2,Yangying2,NingHao—ran2,LIChun—yi
(1.SchoolofBiotechnologyandEnvironmentalEngineering,JiangsuUniversityofScienceandTechnology,Zhenjiang212018,
China;2.InstituteofSpecialEconomicAnimalsandPlants,ChineseAcademyofAgriculutralSciences,Jilin132109,China)
Abstract:Todevelopanoptimalproteomicstechnologyforextractingspecificproteinsfrom penosteum fordeerantler
research,weconstructedasuiteofmethodsforproteinextractionandpurificationfrom pedicleperiosteum.Freshpediele
periosteum wascollectedfroml—year—oldmalesikadeer.Pedielesarethedeercranialpermanentbonyprotuberances,
from whichantlerscastandregenerate.Proteinwasextractedfrom therfozenperiosteum inliquidni~ogen.Twodifferent
methods,AcetoneandTCA—Acetoneprecipitation,wereusedtopurifytheproteinsamples.Theresultsshowedthat
samplespreparedbyTCA—Acetoneprecipitationhadclearerproteinspotsandhigherresolutionoftheelectrophoreticmap.
SoTCA—Acetoneprecipitationmethodisthemostsuitableproteinpurificationmethodofrpreparingthesamplesfor2-DE
ofrpedicleperiosteum.
Keywords:Sikadeer;Pedicleperiosteum;Two--dimensionalelectrophoresis;TCA--Acetoneprecipitation
鹿茸为鹿科动物雄鹿未骨化、带茸毛的幼角 , 柄骨膜组织的蛋 白质组的方法研究角柄骨膜干细胞
具有较高的药用价值。鹿茸还是惟一能完全再生的 中的特异性蛋白,进而探索鹿茸再生之谜。
哺乳动物器官 1【.2l。因此 ,鹿茸可 以作为一种绝佳 双 向电泳(two—dimensionalelectrophoresis,
的生物医学模型来探索哺乳动物组织或器官再生之 2DE)技术是当前分辨率最高、信息量最大的电泳
谜 。进一步研究表 明 ,鹿茸再生是从角
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