应用多重套式RTPCR检测儿童急性淋巴细胞白血病的融合基因.pdfVIP

临床检验杂志2005 年第23 卷第2 期 Chinese JournaI of CIinicaI Laboratory Science ，2005 ，VoI. 23 ，No. 2 9 I 文章编号：I00I-764X（2005 ）02-009I-04 中图分类号：R730 . 43 ，@503 文献表识码：A ·论著 · 应用多重套式RT-PCR 检测儿童急性淋巴细胞白血病 的融合基因＊ I I I 2 2 2 2 何军 ，陈子兴 ，薛永权 ，李建琴 ，何海龙 ，黄益萍 ，朱伶俐 （I. 苏州大学附属第一人民医院江苏省血液病研究所， 江苏苏州2I5006 ；2 . 苏州大学附属儿童医院儿科研究所） 摘要：目的 研究染色体结构易位所致的融合基因在儿童急性淋巴细胞白血病（ALL ）的表达。方法 采用多重套式RT-PCR 结合染色体R 带或G 带核型分析、流式细胞仪细胞免疫表型检测对64 例儿童ALL 进行分析。结果 64 例ALL 患儿中23 例 （36. 0% ）具有I3 种染色体畸变产生的融合基因，包括 E2A/ PBXI，E2A/ HLF ，TEL/ AMLI，TLS/ ERG ，MLL/ AF4 ，MLL/ AF9 ， MLL/ AFI0 ，MLL/ AFX ，MLL/ AF6 ，MLL/ ELL ，dupMLL ，TALID ，HOXII。ALL 患儿融合基因和染色体总畸变率为 67 . 2% （43/ 64 ）。结论 多重套式RT-PCR 结合染色体核型、免疫表型是儿童ALL 临床诊断、治疗和预后判断的重要依据。 关键词：白血病；融合基因；多重套式逆转录聚合酶链反应 急性淋巴细胞 白血病（acute IymphobIastic 进行 -MG 检测。 Ieukemia ，ALL ）是儿童白血病中最常见的类型，50 !. # . $ 多重套式逆转录PCR 设立8 组平行PCR 多种特异的染色体易位形成的融合基因与其发病密 反应，分别使用I ~ 8 组多重PCR 引物，引物参照文 切相关。近年来，采用多重PCR 方法，同时筛选可 ［2 ］ 献 ，见表I。采用广泛表达的转录因子增强子结 划分儿童ALL 危险度的染色体易位，包括t（I；I9 ）、 合因子基因（E2A ）mRNA 作为阳性内对照。每组检 t（4 ；II ）、t （9 ；22 ）、t （I2 ；2I ）等，为检测染色体畸变 测的融合基因包括：I inv（I6 ）的CBF/ MYHII；t （X ； ［I］ 提供了新思路 。我们采用多重套式逆转录 II）的MLL/ AFX ；t（6 ；II ）的MLL/ AF6 ；t （II；I9 ）的 （muItipIex reverse transcription ）PCR（RT-PCR ）方法， MLL/ ELL ；2 t （I；II ）的 MLL/ AFIp ；t （II；I7 ）的 同时检测29 种白血病常见的融合基因。 MLL/ AFI7 ；t （I0 ；II ）的 MLL/ AFI0 ；dupMLL 的 ! 对象与方法 MLL/ MLL ；3 t （I；I9 ）的 E2A/ PBXI；t （I7 ；I9 ）的 !. ! 对象 苏州大学附属儿童医院血液科2002 ~ E2A/ HLF ；t （I2 ；2I ）的TEL/ AMLI；SIL/ TALI；4 t 2003 年收治的64 例ALL 患儿。其中ALLI 28 例， （8 ；2I ）的AMLI/ ETO ；t （3 ；2I ）的AMLI/ MDSI；t A